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分子克隆作為分子生物學的一項成熟技術,幾乎每個實驗室都或多或少的會涉及。在分子克隆實驗中,限制性內切酶是克隆產品,但大家也常常因為限制性內切酶的各種問題而感到煩擾。比如小翌常被問到的:1.限制性內切酶種類這么多,不知道如何選擇;2.酶切不完或出現亂切、錯切的情況;3.酶切速度慢,需要1h甚至過夜酶;4.多酶切還需要選擇多款酶切緩沖液?!槍Φ?個問題,小翌會簡單介紹一下什么是限制性內切酶,不同內切酶的分類如何,讓您對限制性內切酶有一個更全面的認識。針對第2~4個問題,翌圣FuniCut®系列快
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什么是病毒滴度呢?就像重組蛋白合成以后需要檢測純度一樣,病毒包裝后的效力如何,如何定量,也是必須要檢測的,專業術語稱為:病毒滴度的測定。病毒滴度是指單位體積液體中具有生物活性的病毒顆粒數,是衡量病毒數量和毒力的一個重要指標。病毒滴度測定是指確定給定樣品中病毒顆粒的濃度的過程。它是評估病毒產品,如疫苗、基因治療載體或診斷試劑的質量和效力的一個重要參數。病毒滴度檢測方法比較病毒滴度的測定方法有多種,主要分為物理方法和生物方法兩大類。物理方法是通過測定病毒顆粒的大小、形態、數量、電荷、光學性質等,來推
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CUT&Tag優于ChIP-Seq的關鍵竟是它?前面幾期,小翌介紹過“翌圣轉座酶系列產品助力NGS文庫構建”(戳鏈接了解詳情)。本期,小翌重點聊聊pG-Tn5。什么是pG-Tn5pG-Tn5(pG-Tn5Transposase)是將ProteinG(pG)與經過改造的Tn5轉座酶進行融合,形成的同時具備轉座酶與ProteinG活性的新型融合酶。ProteinG能特異性與抗體結合,從而使得pG-Tn5具備更高的靶向性。Tn5是一種細菌轉座子,經改造的Tn5能夠高效地切割DNA,同時連接上特定的接頭
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01巨噬細胞清除簡介巨噬細胞是體內每個器官中都存在的細胞,存在于表皮、角膜和沒有血管的關節內部,其體內生物學研究的重要方法之一是巨噬細胞耗竭。清除巨噬細胞,可以全面了解巨噬細胞在病理條件下的功能。目前,巨噬細胞清除的主要方法包括構建巨噬細胞缺失動物模型和使用藥物(氯膦酸鹽脂質體)去除法,但是,構建巨噬細胞缺失動物模型價格昂貴,周期長,因此,氯膦酸鹽脂質體(ClodronateLiposomes)是目前最為成熟、方便、經濟的一種巨噬細胞清除工具,可以有效的清除動物體內包括肝臟,脾臟,肺部,血液等多
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精彩回顧 | 四企聯動,共話病原快檢——高通量測序技術助力病原快檢與防控
精彩回顧|四企聯動,共話病原快檢——高通量測序技術助力病原快檢與防控8月24日下午,由華大智造、吉因加、金匙醫學和翌圣生物聯合主辦的“四企聯動,共話病原快檢——高通量測序技術助力病原快檢與防控”的云聽會落幕,這場齊聚設備商、服務商和原料商的研討會,從不同的視覺角度,為賦能病原領域的診斷和監測等角度提供不同的病原快檢與防控見解,思想的碰撞為大家帶來了病原快檢前沿的新設備、新興技術和優質試劑。四企聯動賦能病原快檢與防控華大智造DNBSEQ測序平臺加速病原檢測。華大智造帶來了全球同等通量測序儀中速度最 -
mRNA合成的關鍵步驟之一是將質粒DNA進行線性化,這一步需要使用限制性內切酶,IIs型內切酶是質粒線性化的內切酶,因為它們在識別位點下游切割DNA,可確保所設計的poly(A)尾的完整性,線性化后的DNA模板上不會留下“疤痕”,IVT過程中也不會添加不需要的核苷酸。BsaI是常見的IIs型內切酶之一,在mRNA合作中起著重要作用。圖1.BsaI識別位點及切割序列翌圣GMP級別BsaI翌圣的BsaI由大腸桿菌重組表達,GMP標準生產,酶切效率高、星號活性低、末端完整性良好,可用于mRNA疫苗生產
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說到RNA提取,總是避不開Trizol(此處指總RNA抽提試劑,下同),作為總RNA提取的方法,裂解能力強,適用范圍廣,適用動植物組織還有小量樣本及難提取的組織,例如皮膚,結締組織,還可以用于細菌真菌等微生物的總RNA提取,優點顯而易見,缺點也是不容忽視,Trizol它離不開氯仿啊!氯仿早在2017年就被世衛癌癥研究機構列入2B類致癌清單了,吸入,食入,皮膚吸收,主要作用于中樞神經,有麻醉作用,對心、肝、腎有損害,還有提取伴侶β-巰基乙醇也是危險品,刺激眼睛、呼吸道粘膜,引起慢性咽炎,經皮膚、吞
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常用報告基因有哪些種類?一文讀懂!什么是報告基因?報告基因(reportergene)是一種編碼在內源蛋白背景下易被檢測出來的蛋白質或酶的基因。報告基因與目的基因或調控序列相連,通過間接或直接檢測報告基因編碼產物的信號,比如報告蛋白、mRNA、酶等,直觀反映細胞內基因的轉錄活性或表達水平。一般報告基因的特點是無毒、無免疫原性、易于檢測、具有一定的特異性。報告基因編碼產物的半衰期是比較關注的一個關鍵點。編碼產物半衰期和報告基因的應用領域息息相關。[1]那么報告基因該如何選擇呢?在選擇報告基因時一般