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介紹PI(Propidiumiodide),即碘化丙啶,是一種常用的熒光染料,在細胞生物學研究中發揮著重要作用。它不能透過完整的細胞膜,但在細胞凋亡晚期或細胞膜受損時,能夠進入細胞并與核酸結合,發出紅色熒光。PI常用于細胞活力檢測、細胞周期分析以及細胞凋亡研究等領域。圖1PI的化學結構式技術原理原理PI不能穿透細胞膜而被排斥在活細胞外,但是可以穿過破損的細胞膜而對核染色。利用這一特性,通常與Calcein-AM、Hoechst33258或Hoechst33342等活細胞熒光探針一起使用,同時對活
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Hoechst 33258/ Hoechst 33342:細胞核染色的重要染料
產品介紹Hoechst是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,它在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光,對細胞的毒性較低。Hoechst常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測,也可以用于普通的細胞核染色,或常規的DNA染色。技術原理DNA結合:Hoechst能夠特異性地與雙鏈DNA結合,通過插入到DNA的小溝中,形成穩定的復合物。這種結合方式使得染料的熒光特性發生改變,在特定波長的激發光下發出藍色熒光。熒光特性:Hoechst在紫外光或近紫外光激發下發出藍色熒光,其激發波長通常在3 -
內質網內質網是由一層單位膜圍成的連續的網狀膜系統,可分為糙面內質網(RoughEndoplasmicReticulum,RER)和光面內質網(SmoothEndoplasmicReticulum,SER)。內質網染色的意義1、觀察內質網形態結構:染色后可以在顯微鏡下清晰地觀察到內質網的形態、大小、分布以及與其他細胞器的關系。這有助于深入了解內質網在不同細胞類型、不同生理狀態下的結構特點,為研究內質網的功能提供基礎。2、疾病診斷在某些疾病狀態下,內質網的結構和功能會發生改變。通過內質網染色可以觀察
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產品介紹DAPI,也稱DAPIdihydrochloride,是一種常用的核酸染料,和EB(ethidiumbromide)相比,DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。盡管DAPI不能通過活細胞膜,但可以通過提高濃度使之進入活細胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來檢測酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,MicroplasmDNA以及染色體DNA。技術原理DAPI可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結合,產生比自身強20多倍的藍色熒光。DAPI也可對RNA進行染色,染色機理是其
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介紹細胞凋亡(Apoptosis)通常是指機體細胞在發育進程中或者受到某些特定因素影響時,經由細胞內基因及其產物的調控而引發的一種程序性細胞死亡現象。在細胞凋亡的途徑里,各個事件的發生具有時序性,依先后順序逐一出現,最終促成凋亡小體的呈現,接著細胞便發生凋亡。細胞凋亡在胚胎發育與形態發生、維持組織內正常細胞群體的穩定、機體的防御及免疫反應、疾病或中毒引發的細胞損傷、老化以及腫瘤的發生發展等方面都起著至關重要的作用,并且具備潛在的治療價值。圖1:細胞凋亡途徑各時序性事件檢測原理正常細胞膜的磷脂分布
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3’-5’方向的dsDNA外切酶,從dsDNA鏈的3’端逐個去除單核苷酸
重組酶聚合酶擴增(RecombinasePolymeraseAmplification,RPA)是一種新型核酸恒溫擴增技術,可以在37~42℃條件下,10~30min內實現待測靶標的快速檢測。它具有反應靈敏度高、特異性強、對儀器依賴程度低且可整合多種檢測模式等優點,特別適用于基層和現場即時檢測,可廣泛應用于體外診斷、動物疫病、食品安全、生物安全、農業等領域。圖1.RPA等溫擴增技術原理圖[1]目前常用的與RPA擴增相結合的檢測方法有電泳法、熒光探針法、側流層析試紙條(LF-RPA)、絮凝分析檢測 -
逆轉錄酶(ReverseTranscriptase,簡稱RT酶)是一種能夠將RNA模板轉化為互補DNA(cDNA)的酶。在分子生物學研究中,逆轉錄酶的應用極為廣泛,特別是在分子診斷領域發揮著作用。通過逆轉錄過程,可以將病毒的RNA基因組轉換為cDNA,之后便可以利用如qPCR等技術對其進行擴增和檢測。這一特性使得對諸如艾滋病、甲型流感以及乙型流感這類RNA病毒進行準確診斷成為可能。圖1.逆轉錄流程示意圖追求更快速、更靈敏且操作更為簡便的RT-qPCR分子診斷試劑已成為當前的主要發展趨勢。作為RT
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DNA聚合酶是PCR反應的核心組分,廣泛應用于生物及醫學研究等領域。對于普通PCR,常規熱穩定DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)即可滿足需求。但對于高通量測序,擴增產物的準確性非常關鍵,優選高保真酶進行擴增。常規的高保真擴增酶無法讀取和擴增含有尿嘧啶和次黃嘌呤的模板,翌圣生物通過定向改造,推出HieffCanace®Uracil+High-FidelityDNApolymerase,該聚合酶可兼容含U堿基模板和常規模板,擴增效率高保真性好,而且酶本身各項殘留均很低,滿足多種應用方向的擴增需求。