聯系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年
- 聯系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區天雄路166弄1號3樓
- 網址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
每年的5月8號是“世界卵巢癌日"，根據世界衛生組織國際癌癥研究機構（IARC）發布的2020年全球癌癥發病數據報告顯示：2020年中國新發癌癥病例457萬例，其中男性248萬例，女性209萬例，2020年中國癌癥死亡病例為300萬例，其中男性182萬例，女性118萬例，在婦科三大腫瘤中卵巢癌的死亡率。
圖.2020年中國女性癌癥新發病例數類型
卵巢癌類器官（organoids）是指利用卵巢瘤細胞等在體外培養出的3D細胞培養物并具有一定的空間結構組織類似物。卵巢癌類器官可以作為疾病模型，相較于傳統2D疾病模型，其在闡明疾病的發展、穩態性和發病機理等與體內環境更加接近，能作為卵巢癌治療、診斷和發病機制研究的理想試驗模型。
卵巢癌類器官構建
1、取材：標本離體后，盡快取材。采用無菌器械，保證無菌環境，將腫瘤組織放入含有5 mL的原代組織保存液的 15 mL 離心管中，4℃轉運。
2、清洗：在生物安全柜中取出樣品管，去除組織保存液，加入適量冷的添加有雙抗的 PBS，反復清洗后，去除 PBS。
3、重復清洗：重復第 2 步驟 3 次。
4、組織處理：去除 PBS緩沖液后，將組織塊移至10 cm含10 mL冷原代 組織保存液的無菌培養皿中，用無菌眼科顯微剪將組織剪碎（直徑約 0.5mm~1mm）。
5、重復清洗：使用常溫PBS，重復第2步驟3次。
6、收集組織碎片，加入組織消化液消化20~30 min，過70 μm篩網，收集卵巢癌細胞。
7、紅細胞裂解：加入10 mL紅細胞裂解緩沖液，室溫下在翹板搖床上搖10 min。
8、重復清洗：裂解完畢，使用常溫 DMEM/F12，重復第 2步驟3次。
9、類器官種板：調整細胞密度為2~3×106，與基質膠1:1均勻混合，將細胞混懸液以40-60 uL每孔種在24孔板中，37℃放置15~30 min，加入預熱的類器官培養液，每個孔 750 uL。
10、類器官培養：將培養板放在 37℃ CO2培養箱培養,每2天更換培養液。加入培養液時，吸頭朝向側壁，緩慢加入。
11、類器官觀察：每天觀察類器官并拍照，了解初始類器官數量、增殖速 度、形態、微生物污染情況等。
實驗結果
圖.卵巢癌類器官不同周期培養結果（P為培養代次，d為培養時間）
FAQ
基質膠的操作要注意哪些事項？
所有操作需在無菌環境下進行，應使用預冷的移液器以保證基質膠呈勻漿狀。
獲取臨床樣本，如何避免污染？
①取材時盡量保證無菌取材；
②提取前可以用含雙抗的PBS浸泡幾分鐘：常見與外界環境有接觸可能的胃、腸、膀胱等位置腫瘤建議用含3%~5%雙抗的PBS浸泡5-10 min，其他常見腫瘤用含1%~2%雙抗的PBS浸泡5min左右；
③提取細胞過程中所用試劑均加1%雙抗及合適濃度的原代抗生素。
腫瘤組織采集、保存、運輸注意事項
盡可能多采集腫瘤細胞含量高的腫瘤組織，并縮短組織樣本在空氣中暴露的時間，以減少污染概率；采集的腫瘤組織樣本盡快置于裝有專用樣本保存液的無菌管中，低溫（4 ℃左右）下快速運轉至檢測單位（盡量保證采樣后2~4 h內送到）。
病灶和癌旁培養出的類器官有區別嗎？腫瘤組織的取材部位有什么要求？
有差別，腫瘤本身具有異質性，不同來源的類器官之間存在差異是很常見的現象，從形態上看，原發病灶來源的類器官比癌旁來源的類器官更具有侵襲性的結構，一般病灶形態上更加不規則一些。如果希望在建模或藥物篩選方面盡量減小誤差，可以在活性好的地方多位置取樣。
產品選擇
產品名稱 | 產品編號 | 規格 |
Cebrary®Tissue Digestion Solution 組織消化液 | 41423ES10/30 | 10/30 mL |
Cebrary®Cell recovery solution for Organoid類器官回收液 | 41421ES30/60 | 30/100 mL |
Cebrary®Cell freezing medium for Organoid 類器官凍存液 | 41422ES30/60 | 30/100 mL |
Cebrary® Ovarian cancer Organoid Growth Medium (Human)卵巢癌類器官生長培養基 | 41433ES60/76 | 100/500 mL |
相關產品
產品類型 | 產品名稱 | 產品編號 | 規格 |
基本濃度 | Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質膠 | 40183ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 | 40184ES08/10 | 5/10 mL | |
低生長因子 | Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基質膠 | 40185ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix GFR， Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 | 40186ES08/10 | 5/10 mL | |
高濃度 | Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基質膠 | 40187ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 | 40188ES08/10 | 5/10 mL | |
Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基質膠 | 40189ES08/10 | 5/10 mL | |
干細胞專用 | Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基質膠 | 40190ES08/10 | 5/10 mL |
類器官專用 | Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 | 40191ES08/10 | 5/10 mL |
Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾膠原蛋白I | 40125ES10/50 | 2/10 mL | |
Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail鼠尾膠原蛋白I型 | 40136ES10/50 | 2/10 mL |
