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UCF·ME® UltraNuclease

2021-8-2  閱讀(345)

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什么是UCF·ME® UltraNuclease

UltraNuclease全能核酸酶,又稱為廣譜核酸酶、非限制性核酸內切酶。能夠在多種實驗條件下切割和降解各種形式的DNARNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。

UltraNuclease 生產全程均在GMP生產車間完成,質檢方法均嚴格按照藥典中的方法進行。該酶無蛋白酶活性、不含內毒素和任何病毒污染物,適用于各種應用場景,可適用于各種生物制品工業生產過程中殘留核酸的去除。

廣闊的應用前景

1、降低細胞/細菌裂解時核酸釋放產生的黏度,并且適用于任何裂解方式。

2、在大規模的層析純化時,避免由于大量的核酸吸附在層析介質上降低蛋白質的有效載量從而降低純化得率。

3、在 ELISA、二維電泳和免疫印跡分析中,提高分辨率和回收率。

4、消除重組蛋白、疫苗等生物制品的外源性核酸殘留。

產品特性

1、酶的比活≥1.5×10U/mg(通用底物絕對定量法)

酶活*37℃pH 8.0反應條件,2.625 mL反應體系中,在30 min內使△A260吸收值變化1.0(相當于*消化37 μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸)所用的酶量定義為一個活性單位(U

2、酶的純度≥99%HPLC

3、不同反應條件對酶活的影響(部分數據)

為了探索UltraNuclease最合適的操作條件,我們研究了在多種緩沖體系下對酶活性的影響以下僅展示部分數據,如需完整數據,請聯系我們。

4、儲存及凍融穩定性

-20℃4℃儲存一個月,酶活幾乎無變化,37℃儲存一個月,酶活降低約30%

-80℃~25℃反復凍融10次,酶活性不受影響。

5、質檢標準符合GMP生產標準

檢測項目

質量標準

檢測方法

酶活

250-300 U/uL

通用底物法

比活

≥1.5×10U/mg

通用底物法

蛋白純度

≥99%

SDS-PAGE

蛋白酶

符合要求

通用底物法

細菌內毒素

符合要求

凝膠法

宿主蛋白

陰性

ELISA

宿主DNA

陰性

qPCR

無菌檢測

無菌生長

通則1101

病原體檢測

陰性(不得檢出)

參照內部方法

支原體檢測

陰性(不得檢出)

參照內部方法

重金屬檢測

符合要求

通則0821


UltraNuclease ELISA kit (全能核酸酶檢測ELISA kit)

在正常的純化步驟中,全能核酸酶作為雜質很容易被去除。為了檢測全能核酸酶的殘留,翌圣研發了配套的UltraNuclease ELISA kit能夠準確檢測樣本中全能核酸酶的殘留量,該試劑盒在線性、重復性、回收率及特異性等方面均表現優異


1、線性范圍:0.047~3 ng/mLR20.99










2、批次間重復性好

在樣本中加入固定濃度的UltraNuclease,用3個不同批次的ELISA試劑盒進行檢測,在核酸酶濃度3~0.186 ng/mL之間,檢測回收率均在70%~110%之間,CV10%

3、模擬樣本回收率

對于不同濃度UltraNuclease核酸酶樣本回收率均在70%~130%之間,且優于其他品牌。

4、特異性強

我們評估了全能核酸酶抗體與8種常見樣本的非特異性結合,干擾組與對照組結果重合,未見干擾。

表示與陰性相比有顯著性差異;NS:表示與陰性結果無顯著差異

常見問題FAQ

1、在哪一步中加入 UltraNuclease

這取決于您處理的樣本。在病毒純化時,一般在病毒澄清后加入;大腸桿菌蛋白純化時,可以在菌體裂解時就加入;在處理細胞結團問題時,可以直接加入培養基中與細胞共培養。

2、如果反應溫度無法達到37℃,該如何使用?

UltraNuclease的酶活性受到溫度、處理時間、酶活單位的影響,如果溫度無法達到37℃,可以適當添加酶的用量,或者延長孵育時間。

3UltraNuclease是否與蛋白酶抑制劑兼容?

可以兼容,但需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTAEDTA 開始高于1mM時,EDTA將抑制部分核酸酶的活性。

4、如何去除 UltraNuclease

可通過 TFF、透析及色譜柱等方法將其去除。

5UltraNuclease ELISA kit可否用于其他品牌全能核酸酶殘留的檢測?

我們不建議這樣做。ELISA kit *是基于UltraNuclease開發,能夠對UltraNuclease進行準確定量。其他品牌的全能核酸酶在序列、生產工藝等方面可能與UltraNuclease有所不同,檢測結果可能不準確。

相關產品

產品名稱

貨號

規格

UCF.ME® UltraNuclease GMP-grade

全能核酸酶

20157ES25/60/80/90

25KU/100 KU/1MU/5MU

UltraNuclease ELISA kit

36701ES59

96T



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