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選擇ELISA試劑盒的小秘籍
閱讀：1700 發布時間：2015-9-23 為什么選擇ELISA試劑盒？
以TNF-a為例，Meso Scale Discovery? Vplex電化學發光試劑盒以0.04pg/mL的靈敏度是普通ELISA（7 pg/mL左右）的100多倍。如果實驗樣本中的TNF-a低于7pg/mL,這就意味著實驗數據會無法檢測，實驗沒有定量結論。另外一個案例，臨床常規測定普通CRP的方法檢測線性一般為3~200mg/L，而預測心血管事需要更高靈敏度的CRP，超敏或高敏CRP （hs-CRP）。
ELISA試劑盒檢測什么樣本？試驗周期多長？
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
如實驗研究周期較長，ELISA試劑盒盡量選擇一個批次的，以防止不同批次間的差異。然而由于普通ELISA有效期在3-12個月，而實驗周期往往在1-2年以上，一些長期臨床實驗項目甚至在5-10年，因而經常面臨不同批次的挑戰。而Meso Scale Discovery?Vplex試劑盒經過54個月穩定性測試。