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滬鼎進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品分析制備細(xì)菌蛋白質(zhì)樣本，八步驟決定實(shí)驗(yàn)結(jié)果
閱讀：1274 發(fā)布時(shí)間：2014-4-8 今天為止，就快要算上是本月的三分之一啦，這時(shí)間如流水，快得讓人顧之不及。然而新的一天中，上海滬鼎會(huì)分享新的實(shí)驗(yàn)，我公司每周都會(huì)有的公司動(dòng)態(tài)文章發(fā)布，歡迎朋友們關(guān)注。下面我們就進(jìn)入今天的主題，來(lái)看進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品分析制備細(xì)菌蛋白質(zhì)樣本，八步驟決定實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)中需要用到的物品：
1、表達(dá)待檢測(cè)蛋白質(zhì)的細(xì)菌
2、50mmol/L Tris·Cl (pH7.4)
3、2×SDS凝膠加樣緩沖液
100mmol/L Tris·Cl (pH 6.8)
200mmol/L 二硫蘇糖醇（DTT）
4% SDS(電泳級(jí))
0.2% 溴酚藍(lán)
20% 甘油
不含有二硫蘇糖醇（DTT）的2×SDS凝膠加樣緩沖液可保存于室溫，臨用前須從1mol/L二硫蘇糖醇儲(chǔ)存液現(xiàn)用現(xiàn)加于上述緩沖液中。
4、臺(tái)式離心機(jī)
5、超聲破碎儀
6、水浴箱
7、渦漩振蕩器
8、加樣器與吸頭等
實(shí)驗(yàn)八步驟：
1、表達(dá)靶蛋白大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)適當(dāng)時(shí)間后，用微量離心機(jī)以12 000g離心30s，收集1ml培養(yǎng)的菌體；
2、吸取培養(yǎng)液，加入0.5ml用冰預(yù)冷的50mmol/L Tris·Cl (pH7.4)，振蕩沉淀的菌體，使之復(fù)懸，用微量離心機(jī)于0℃以12 000g離心30s回收菌體；
3、再次吸出上清液，小心地吸凈管壁上的液滴，盡可能使沉淀物不帶有殘留液體；
4、加入25ul水，振蕩使沉淀復(fù)懸，一旦菌體分散開(kāi)來(lái)，立即加入25ul 2×SDS凝膠加樣緩沖液，繼續(xù)振蕩20s；
5、樣品在沸水浴中放置5min；
6、采用帶有浸入尖頭或能在冷卻杯中同時(shí)處理多個(gè)樣品的超聲處理儀對(duì)DNA進(jìn)行剪切，根據(jù)所用超聲處理儀的輸出功率及其設(shè)定狀態(tài)，以zui大功率處理0.5~2min應(yīng)能有效地將裂解液粘度降至可控水平；
7、樣品于室溫以12 000g離心10min，將上清液移至另一管中，棄沉淀物；
8、吸取經(jīng)剪切或超聲處理的樣品25ul電泳，剩余樣品保存于–20℃?zhèn)溆谩?br /> 新的一個(gè)月中，我公司上新了進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品，現(xiàn)貨供應(yīng)，了解詳細(xì)信息與*格等等都可以直接來(lái)的給我公司業(yè)務(wù)員，也可以在本留言的，上海滬鼎生物真的非常感謝朋友們的支持。