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實驗蛋白質分離純化透析終點的抉擇
閱讀：3129 發布時間：2013-7-15實驗蛋白質分離純化透析終點的抉擇
在蛋白質分離純化過程中，用到透析方法，但如何判斷透析過程結束了呢？針對具體蛋白質怎么知道要透析多久？ 在蛋白質分離純化實驗中，客戶經常會提及蛋白質透析終點該如何判斷，以下是我司技術根據各種實驗總結的經驗之談，方便大家學習交流。
一：
市場上有種筆式電導儀，測量范圍在1－2000us/cm，價格才一兩百元，使用也非常方便。要是透析后上柱的話，電導在1500以下就可以了。
二：
我做過蛋白的純化，透析也是常做的。
我覺得上面的一些朋友說得太理論了。樓主剛接觸蛋白純化，用的是透析袋吧。
根據我的經驗，想*把蛋白里的鹽分透掉不可能，而且蛋白在透析的過程中多少會損失一部分，所以我覺得如果你的蛋白很珍貴，就不用非透得很干凈，否則適得其反，經常換超純水倒是很重要的，一般透個24小時-48小時足夠了。要加滿水，充分浸泡。
蛋白如果含鹽量高，凍干后往往含有結晶樣的物質比較多，
而蛋白如果含鹽量低，則凍干后往往成棉絮狀
這從表觀上有助于你判斷透析效果，或者你可以取一些蛋白，溶解后測蛋白質質量百分數，剩下的基本就是鹽含量了。
提醒你一下：
透析袋不能太小，否則透析后可能會脹破袋子，那就慘了。
太大也不好，容易讓蛋白殘留在袋內，記得用移液器加蛋白，取蛋白，這樣能zui大限度節約蛋白。
三：
如果是NAcl,可用硝酸銀溶液滴到透析液中無沉淀渾濁就可以,同樣道理如果是硫酸根離子可用氯化鋇溶液去滴,別的就不知道了.當然也可用電導儀測定電導,這樣.時間長短和你樣品鹽濃度,透析攪拌速度,用的透析液體積等都有關系,沒確切時間.
四：
測電導是非?？尚械?。
現測你所用透析緩沖液的電導，再測一下你樣品的電導，透析到你的樣品中的電導率與透析緩沖液的電導率接近為止。
看你更換緩沖液的速度，如果你不斷攪拌并1h左右更換一次緩沖液的話4-6次就可以透析的差不多了，如果你不想多次從透析袋中取出樣品可以在第六次的時候測一下電導；如果你在4度透析的話建議4h更換一次，加上過一夜一共換3-4次就差不多了。關鍵看不在什么環境下透析，你的樣品在什么樣的環境下比較穩定。
蛋白質的定義：
1：生物體中廣泛存在的一類生物大分子，由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈，經翻譯后加工而的具有特定立體結構的、有活性的大分子。泛指某一類蛋白質，與前面的限定詞組成復合詞時，一律用“蛋白質”，如血漿蛋白質、纖維狀蛋白質、酶蛋白質等，此時“質”字不得省略（習慣詞除外，新命名者從此）。凡指具體蛋白質時，“質”字可省略，如血紅蛋白、肌球蛋白等。
2：不同氨基酸以肽鍵相連所組成的具有一定空間結構的生物大分子物質。
蛋白質（protein）是生命的物質基礎，沒有蛋白質就沒有生命。因此，它是與生命及與各種形式的生命活動緊密在一起的物質。機體中的每一個細胞和所有重要組成部分都有蛋白質參與。蛋白質占人體重量的16.3%，即一個60kg重的成年人其體內約有蛋白質9.8kg。人體內蛋白質的種類很多，性質、功能各異，但都是由20多種氨基酸按不同比例組合而成的，并在體內不斷進行代謝與更新。
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