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CHO細胞與酵母細胞比較
點擊次數：3344 發布時間：2014-11-14
CHO細胞表達系統與畢赤酵母表達系統是當前發展前景看好的兩個表達系統，為了能夠更加直觀地對兩個表達系統有一定的認識，特意在此篇中對兩個表達系統作一定的比較，從而能夠更進一步的對兩個表達系統有更深的了解
一、CHO細胞表達系統
1、優點
CHO細胞屬于成纖維細胞，既可以貼壁生長。也可以懸浮生長。目前常用的CHO細胞包括原始CHO和二氫葉酸還原酶雙倍體基因缺失型(DHFR-)突變株CHO。近年來，為降低生產成本和減少血制品帶來的潛在危害性，動物細胞生產開始使用無血清培養基(SFM)，但SFM往往導致細胞活力差，貼壁性差，分泌外源蛋白的能力差等缺點。另有研究者嘗 試將類胰島素生長因子IGF基因和轉鐵蛋白基因轉入CHO細胞獲得能自身分泌必需蛋白的“超級CHO”，無需在培養基中轉鐵蛋白和胰島素，細胞可在SFM中生長良好。與其他表達系統相比，CHO表達系統具有以下的優點：
（1）具有準確的轉錄后修飾功能，表達的蛋白在分子結構、理化特性和生物學功能方面zui接近于天然蛋白分子；
（2）既可貼壁生長，又可以懸浮培養，且有較高的耐受剪切力和滲透壓能力；
（3）具有重組基因的擴增和表達能力，外源蛋白的整合穩定；
（4）具有產物胞外分泌功能，并且很少分泌自身的內源蛋白，便于下游產物分離純化；
（5）能以懸浮培養方式或在無血清培養基中達到高密度培養。且培養體積能達到1000L以上，可以大規模生產。
2、存在的問題
在過去的幾十年里，人類對動物細胞的培養技術進行了大量的研究開發，取得了很大進展，但是利用CHO細胞表達外源基因的技術水平尚不能滿足生物藥品的開發和生產的要求，目前上游工作中主要存在以下問題：
（1）構建的重組CHO細胞生產效率低，產物濃度亦低；
（2）某些糖基化表達產物不穩定，不易純化；
（3）重組CHO細胞上游構建與下游分離純化脫節，主要表現在上游構建時著重考慮它的表達，而對高教表達的產物是否能有效地提取出來，即分離純化過程考慮較少；
（4）重組細胞培養費用昂貴，自動化水平低下。