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有關(guān)培養(yǎng)基的PH值問(wèn)題
點(diǎn)擊次數(shù)：1540 發(fā)布時(shí)間：2014-10-27
：配培養(yǎng)基的時(shí)候調(diào)PH為7.25，分裝-20度保存，幾天后解凍再測(cè)為7.80，怎么回事啊，難不成每次配時(shí)得調(diào)到7以下嗎？解凍后重新調(diào)PH值，再過(guò)濾分裝，還能用嗎？還能－20度保存嗎？
答：看來(lái)你用的是粉末DMEM，說(shuō)明書(shū)上說(shuō)應(yīng)該加3.7 g碳酸氫鈉，還說(shuō)過(guò)濾的時(shí)候PH值升高0.1-0.2.但是3.7 g碳酸氫鈉對(duì)應(yīng)的是10%的CO2培養(yǎng)環(huán)境，如果你用的是5%的CO2，那么你只要加入1.85 g碳酸氫鈉就行，我試過(guò)，這時(shí)候基本不用調(diào)節(jié)PH值，然后開(kāi)始過(guò)濾，過(guò)濾的時(shí)候PH會(huì)上升，但基本上也是在要求的范圍。但是即使你只加1.85 g碳酸氫鈉，時(shí)間太長(zhǎng)的話，PH值還是會(huì)上升，因?yàn)槟阊b配基的瓶子不是密封的，與空氣中的CO2有接觸，而空氣中的CO2得濃度是低于5%的，那么zui時(shí)間的延長(zhǎng)，碳酸氫鈉緩沖對(duì)在起作用，PH值又上升了，這是不可避免的。當(dāng)然可以加入HEPES，引入新的緩沖對(duì)，相對(duì)來(lái)說(shuō)PH就不容易改變了。
我現(xiàn)在都不測(cè)PH值了，目測(cè)一下就差不多，只要是那種玫瑰紅色就是正常范圍，當(dāng)你對(duì)著光發(fā)現(xiàn)有紫色的時(shí)候，肯定是PH又上升了，如果太紫的話就需要重新調(diào)節(jié)PH值了。如果僅僅是一般的紫色的話沒(méi)問(wèn)題，你可以試試，把培養(yǎng)瓶拿入培養(yǎng)箱中，但一定要把瓶蓋擰松，這樣幾個(gè)小時(shí)后，你的配基的PH就恢復(fù)到正常水平了，因?yàn)檫@時(shí)候配基接觸到了5%的CO2。