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士鋒生物染色體分帶技術
點擊次數：930 發布時間：2014-8-7
染色體顯帶技術是在顯示染色體基礎上發展起來的技術，其優點是能顯現染色體本身更細微的結構，有助于更準確地識別每條染色體及染色體異常疾病。染色體分帶技術能適用于各種細胞染色體標本。
染色體顯帶是沿著整條染色體的長軸，能顯現出著色深淺不同、橫向走的帶型。目前認為染色體顯帶現象是染色體結構所致。但用特殊方法處理后，再用染料染色，則帶型更加清晰，隨顯帶方法不同，顯現出的帶型的特點也不一樣，這說明帶的出現與染料的特異結合相關。人類染色體能顯現出近2000個G帶，這些帶再融合成一般顯微鏡下可見的850條左右的高分辯染色體帶型或350條帶左右的常規帶型。
常見的幾咱顯帶方法：
（一）、G帶
也稱為G顯帶，是zui常用的顯帶方法，具有操作簡便、經濟及標本能長期保存等優點。
1、Giemsa原液的配制：
（1）稱3.75gGiemsa粉置研磨器中，加少許丙三醇研磨，研磨越細越好；
（2）將研細的Giemsa加丙三醇移入500ml棕色瓶內，丙三醇的總量為250ml，用一定量甲醇洗干凈研磨器。
（3）搖勻，置60℃水浴鍋24小時或37℃溫箱72小時，經常搖動。
（4）取出冷卻后，加甲醇總量至250ml混勻，密封棕色瓶備用。貯藏時間越長，染色效果越好。
2、實驗材料：
中期染色體標本；
0.9%氯化鈉注射水；
3%tris液體；
0.25%胰蛋白酶；
Gremsa染色液；
蒸餾水；
水浴鍋；
立式染缸；
定時器或時針；
溫度計；
鑷子及紗布；
刻字筆；
3、操作程序：
（1）消化液配制：取0.9%氯化鈉注射水100ml，加0.25%胰蛋白酶1ml，制成0.025%胰蛋白酶鹽水消化液，加4-5滴tris液調PH6.8左右，移消化液于立式染色缸并置37℃水浴鍋中備用；
（2）染液配制：取立式染缸，加蒸餾水500ml，加3滴tris液調PH并加入Giemea染液1ml左右，用吸管調勻備用；
（3）漂洗液：取立式染缸一個，內加蒸餾水備用；
（4）試消化：待消化液溫度在37℃左右時，取同批標本較多者標本1張，分二節或三節進行消化，每節相差十五秒左右，從45秒或60秒開始增減。取出后先在紗布或吸水紙上直立除去帶出胰蛋白酶，后置蒸餾水染缸內漂洗，取出后，標本斜面朝上，刮去染色缸內染液上浮膜，沿槽插入，每分鐘移動1次，染色3-5分鐘。