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技術文章
如何進行枯草桿菌細胞固定化
點擊次數(shù)：1015 發(fā)布時間：2014-7-3
一、原理：把細胞懸浮在海藻酸鈉溶液中，滴進氯化鈣溶液中，形成海藻酸鈣凝膠小球。細胞保埋在凝膠的小孔中，制成固定化細胞。
二、試劑與材料
1、枯草桿菌細胞：將枯草桿菌在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，在對數(shù)生長期離心(3000r/min，20min)收集細胞。
2、海藻酸鈉溶液：用蒸餾水配制成1.5%的海藻酸鈉，滅菌后備用。
3、氯化鈣溶液：配制成0.1M，滅菌后備用。
注射器、無菌水、固定化細胞培養(yǎng)液
三、操作方法
1、取枯草桿菌濕細胞2g，懸浮在10ml海藻酸鈉溶液中混合均勻。
2、用注射器吸取上述懸浮液，逐滴滴入到50ml氯化鈣溶液中，浸泡30-120min。
3、濾出凝膠珠用無菌水洗滌，除去凝膠珠表面的細胞，得到固定化細胞。
4、將固定化細胞1g，放進25ml培養(yǎng)液中，于37℃振蕩培養(yǎng)16-24h。觀察細胞生長情況，以及凝膠珠直徑和重量的變化。
注意：磷酸鹽會破壞凝膠結構。故固定化細胞培養(yǎng)液應限制磷酸鹽含量，同時要有一定濃度的鈣離子。