QQ交談
您所在位置：產品搜索
請輸入產品關鍵字：
聯系方式
地址：上海市寶山區錦樂路
郵編：200431
聯系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機：13122441390 15900755943
留言：發送留言
個性化：www.shifengsj.com
網址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://www.js967.com/st236594/
郵編：200431
聯系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機：13122441390 15900755943
留言：發送留言
個性化：www.shifengsj.com
網址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://www.js967.com/st236594/
技術文章
士鋒生物凝膠層析法蛋白質脫鹽
點擊次數：1755 發布時間：2014-7-2
一、原理：含鹽蛋白質溶液流經凝膠層析柱時，低相對分子量的鹽分子因浸入凝膠顆粒的微孔中，所以向下移動的速度較慢；而大分子的蛋白質不能進入凝膠顆粒的微孔，以較快的速度流過凝膠柱，從而使蛋白質與鹽分開。
二、材料與試劑：葡聚糖凝膠（Sephadex G25）、洗脫液（蒸餾水或適宜的緩沖溶液）、含鹽的蛋白質溶液、蛋白質檢測試劑、無機鹽檢測試劑（依具體情況而定）
三、操作方法
1、凝膠的準備：稱取葡聚糖5g，加入80ml洗脫液（可用水或適宜的緩沖液），在沸水浴中溶脹30min，用傾瀉去懸浮的小顆粒。然后裝進內徑1－1.2cm，高30－40cm的玻璃柱內。注意裝填均勻，無氣泡和裂紋存在，并保持液面在凝膠表面以上。
2、加樣與洗脫：打開柱的出口，讓柱內的液體慢慢流出，直至液面與凝膠床表面相平，然后加入2ml含鹽蛋白質溶液，至樣品液面剛好到達凝膠床表面時，加入30ml洗脫液（與溶脹和裝柱時所用液體*相同），以0.5－1ml/min的流速洗脫，每5ml裝試管分布收集。
3、收集的蛋白質溶液可用280nm處的紫外光吸收法檢測，也可用福林酚測定。而鹽根據具體的鹽確定檢測方法。