QQ交談
您所在位置：請輸入產品關鍵字：
郵編：200431
聯系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機：13122441390 15900755943
留言：發送留言
個性化：www.shifengsj.com
網址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://www.js967.com/st236594/
士鋒生物雙向電泳的技術流程和樣品制備
點擊次數：1215 發布時間：2014-6-17
基因組學
蛋白質組學：可視為分子生物學的大規模篩選技術，目的在于歸類細胞中的蛋白質的整體分布，鑒定并分析感興趣的個別蛋白，zui終闡明它們的關系與功能。
上述兩種學科的研究內容在互補的水平上研究了細胞的分子架構，又都在各自的水平上提供了增強對方效應的信息，因此二者存在有很強的且帶有系統性相互關系。
Applications of proteomics
• Protein identification/characterization
• Protein-protein interaction
• Post-translational modifications
• SubCellular location
• Elucidation of pathway
• Target validation and toxicology
• Drug discovery
蛋白質組分析的首要要求
將來自于全細胞、組織或生物體中所包含的多達幾千種混合蛋白質進行分離、檢測和分析 。
2-DE技術依然是大多數蛋白質組研究中分離復雜蛋白質混合物的技術 。
雙向電泳的技術流程和樣品制備
雙向電泳的技術流程和樣品制備
雙向電泳分析中的樣品制備
制備原則：
應使所有待分析的蛋白樣品全部處于溶解狀態（包括多數疏水性蛋白），且制備方法應具有可重現性。
防止樣品在聚焦時發生蛋白的聚集和沉淀。
防止在樣品制備過程中發生樣品的抽提后化學修飾（如酶性或化學性降解等）。
*去除樣品中的核酸和某些干擾蛋白。
盡量去除起干擾作用的高豐度或無關蛋白，從而保證待研究蛋白的可檢測性。
不同樣品的基本處理方法
可溶性樣品
固體組織樣品
細胞
樣品的分級處理：
通過采用亞細胞分級、液相電泳和選擇性沉淀等方法對蛋白質樣品進行分級處理，可降低樣品的復雜性并富集低豐度蛋白質。當前zui簡單有效的處理是采用分級抽提，按樣品溶解度不同進行分離。