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士鋒生物具體層析方法：氣相色譜層析
點擊次數：852 發布時間：2014-5-23
1)載氣 常用的載氣主要有氮、氬、氫和二氧化碳等。這些氣體一般都由高壓氣瓶供給
(2)進樣器 氣相色譜儀可以用于分離固相、氣相和液相標本。液相標本采用微升注射器穿過橡皮隔片注入，氣相標本采用特種氣相注射器注入。
(3)譜柱及加熱爐 色譜柱一般由金屬或玻璃制成，通常采用的柱長2m~4m，內徑2mm，毛細管柱長度可達20m～150m，內徑為0.2mm。
載體一般采用惰性、多孔的固體顆粒。多由硅藻土或玻璃珠制成，分析不同極性的微生物化合物，為了獲得zui適的分離條件，要求有不同固定相的載體。目前比較常用的載體有：聚乙二醇(CarbOwax 20M)、F F A P(聚乙二醇20M 和2-硝基對苯二甲酸的反應產物)，OV-17(苯基甲基硅酮)。OV-210、SE-30(甲基硅酮)、Chromosorb G(白色硅藻土載體)等。柱加熱爐在溫度控制上是非常重要。
(4)紀錄儀
(5)數據處理裝置 一般均附有數據處理計算機。
試驗條件的選擇
(1)柱的選擇 要注意極性及zui高使用溫度，柱溫不能超過zui高使用溫度。固定相按極性相似的原則選擇。
色譜柱的內徑大小、長度都能影響分離率。一般而言，內徑越小，長度越長，分離效果越好，一般柱長為1m～5m(毛細管柱則20m～100m)。
填充劑顆粒一般采用40目～60目，60目～80目及80目～100目大小。長柱子宜用粒度大些的，以減少柱壓降，短柱子則用粒度細的。
氣相色譜中固定液的含量對分離效率的影響較大。一般采用固定液與載體重量之比為15︰100～25︰100。采用高靈敏度的檢測器，由于進樣量減少，固定液含量可以降至5︰100以下。這樣可以使用較低柱溫，從而提高柱效，縮短分析時間。但固定液用量太少會引起吸附。
(2)柱溫選擇 柱溫選擇對分離度影響很大，常是條件選擇的關鍵。選擇的基本原則是：在使zui難分離的組分有盡可能好的分離高度的前提下，盡可能采取較低溫度，但以保留時間適宜及不拖尾為度。
①高沸點混合物(200℃～400℃)，若需在較低的柱溫下分析，可采用低固定液配比1％～3%，采用高靈敏檢測器，柱溫可比沸點低100℃～150℃，在200℃～250℃的柱溫下分析。