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士鋒生物質(zhì)壁分離法測定植物細胞的滲透勢
點擊次數(shù)：1036 發(fā)布時間：2014-3-3
將植物組織放入一系列不同濃度的蔗糖溶液中，經(jīng)過一段時間，植物細胞與蔗糖溶液間將達到滲透平衡狀態(tài)。如果在某一溶液中細胞脫水達到平衡時剛好處于臨界質(zhì)壁分離狀態(tài)，則細胞的壓力勢ψp下降為零。此時細胞液的滲透勢ψs等于外液的滲透勢ψs0，即ψs=ψs0，此溶液稱為該組織的等滲溶液，其濃度稱為該組織的等滲濃度，因此，只要測出植物組織的等滲濃度，即可計算出細胞液的滲透勢ψs。實際測定時，由于臨界質(zhì)壁分離狀態(tài)難以在顯微鏡下直接觀察到，故一般均以初始質(zhì)壁分離作為判斷等滲濃度的標準。處于初始質(zhì)壁分離狀態(tài)的細胞體積，比吸水飽和時略小，故細胞液濃縮而滲透勢略低于吸水飽和時的滲透勢，此種狀態(tài)下的滲透勢稱基態(tài)滲透勢。
【儀器與用具】
顯微鏡1臺；載玻片與蓋玻片各若干；溫度計1支；尖頭鑷子1把；刀片1片；小培養(yǎng)皿（直徑6cm）9套；試劑瓶若干；燒杯、容量瓶、量筒、吸管等；吸水紙適量。
【試劑】
1mol/kg H2O蔗糖溶液 稱取預(yù)先在60～80℃下烘干的蔗糖34.2g溶于100g蒸餾水中，即為1質(zhì)量摩爾濃度蔗糖溶液。
蔗糖系列標準液 取干燥潔凈的小試劑瓶9支編號，用1mol/kg H2O蔗糖溶液依C1V1=C2V2公式配制0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70mol/kg H2O等一系列不同濃度的蔗糖溶液（具體范圍可根據(jù)材料不同而加以調(diào)整），貯于試劑瓶中，瓶口加塞以防蒸發(fā)濃縮。
0.03%中性紅溶液。
【方法】
1．選大蔥或洋蔥鱗莖內(nèi)表皮、小麥葉片等作實驗材料。
2．取干燥潔凈的培養(yǎng)皿9套編號，將配制好的不同濃度蔗糖溶液按順序加入各培養(yǎng)皿中使成一薄層，蓋好培養(yǎng)皿蓋備用。
3．用鑷子剝?nèi)」┰嚥牧舷卤砥せ蛴玫镀⌒墓稳⌒←溔~片上表皮（參考實驗1），大小以0.5cm2為宜。吸去切片表面水分，立即浸入不同濃度的蔗糖溶液中，每一濃度4～5片。
為便于觀察，可先將切片于0.03%中性紅內(nèi)染色5min左右，吸去水分，再浸入蔗糖溶液中，但如不加染色即能區(qū)別質(zhì)壁分離時，仍以不染色為宜。