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免疫組織化學(xué):幾種溶液的配制方法
點擊次數(shù)：1059 發(fā)布時間：2013-12-16
1、PBS:
取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸餾水中，混勻，測pH值應(yīng)在7.2~7.4之間，若偏離此范圍，請用0.1N的HCL或NaOH調(diào)整。
2、TBS：
2.1 Tris緩沖液配方：（0.5 M pH7.6）
Tris（三羥甲基氨基甲烷）
60.57g
1N HCL
約420ml
雙蒸水
加至1000ml
Tris緩沖液配制方法：
先以少量雙蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）將pH調(diào)至7.6， zui后雙蒸水加至1000ml。此液為儲備液，4℃冰箱中保存。
2.2 TBS配方：
Tris-HCI緩沖液（0.5M pH7.6）
100ml
NaCI
8.5~9g （0.15mol/L）
雙蒸水
加至1000ml
TBS配制方法：
先以少量雙蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl緩沖液，zui后加雙蒸水至1000ml，充分搖勻。
3、枸櫞酸鹽緩沖液（Citrate buffer）：
3.1 儲存液：
A. 0.1M枸櫞酸溶液：稱取21.01g枸櫞酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸餾水中。
B. 0.1M枸櫞酸鈉溶液：稱取29.41g枸櫞酸鈉（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸餾水中。
3.2 工作液：
取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸餾水中，溶液pH值應(yīng)為6.0±0.1
4、胰酶（Trypsin）：
4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液：
常用濃度為0.125%，即使用前將一滴試劑1胰酶溶液和三滴試劑2胰酶稀釋液均勻混合（1:3稀釋），則可直接滴加使用。胰酶的zui終濃度可以根據(jù)使用者的要求進行調(diào)整，濃度范圍可以從0.05%（1:10稀釋）至0.25%（1:1稀釋）。