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技術文章
士鋒生物神經系統染色技術介紹
點擊次數:857 發布時間:2013-10-31
神經病理學是組織病理學的一個重要組成部分,神經病理學技術是一門較特殊的病理技術。神經組織的結構和功能較為復雜的特殊,用常規方法處理,常得不到想要的東西,因此,要想獲取想要的東西,必須靠特殊的處理方法,才能將其充分地顯示出來。神經系統方面可顯示的物質較多,如尼氏小體、髓鞘、變性髓鞘、神經纖維和神經膠質細胞等等。這些都要靠特殊的銀浸染技術,才能顯示出來。下面將介紹幾種顯示上述物質的方法。
應用:神經系統染色應用于神經系統方面的各種疾病,如創傷、中毒、感染等引起神經系統方面的疾病,應作正常髓鞘和變性髓鞘的染色,以觀察髓鞘的變化及脫失情況,如脫髓鞘假瘤與彌漫的纖維星型細胞瘤鏡下有非典型性核分裂象和彌漫浸潤的單核細胞,充分發育的巨噬細胞缺少細胞將會誤診為膠質瘤,應作膠質細胞和神經纖維染色。
(一)蘇木素VG法染中樞神經
1、切片脫蠟至70%酒精
2、Weigert氏鐵蘇木素染10分鐘
3、自來水稍洗
4、如有必要,用1%鹽酸酒精分化
5、流水洗10-15分鐘
6、VG液染30分鐘
7、蒸餾水快洗
8、95%酒精分化
9、脫水、透明、封固
結果:細胞:灰黑色
髓鞘:灰白色
膠原:紅色
肌纖維:黃色
神經細胞細胞漿 黃色/琥珀色
膠質纖維 琥珀色
(二)神經細胞尼氏體染色
正常的神經細胞都含有一定數量的尼氏化,它們主要分布于神經細胞的漿中,形狀有大有小,如三角形,有的為橢圓形。這些物質能被大部分的藍色染料所染色,這些染料如焦油堅牢紫(Cresyl fast violet)亞甲藍(methylene blue)甲苯胺藍(toluidine blue)硫董(thionin)等鈄其染為藍色。但是,當神經細胞受傷后,胞質內的尼氏體更可發生變化,嚴重的可消失。
焦油堅牢紫顯示尼氏體
焦油堅牢紫 1g
蒸餾水 100ml
操作方法:
1、切片脫蠟至水
2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、*脫水,二甲苯透明,中性樹膠
結果:神經細胞單位:紫-藍色
細胞核:紫-藍色
尼氏體:紫-深藍色
注意:1、應用酒精分化切片,要迅速,防止過度分化,將切片上的顏色全部脫掉。
神經纖維染色