會(huì)員.png)
QQ交談
您所在位置：產(chǎn)品搜索
請(qǐng)輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字：
聯(lián)系方式
地址：上海市寶山區(qū)錦樂(lè)路
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機(jī)：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個(gè)性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://www.js967.com/st236594/
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機(jī)：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個(gè)性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://www.js967.com/st236594/
技術(shù)文章
上海士鋒生物大腸桿菌感受態(tài)的制備過(guò)程
點(diǎn)擊次數(shù)：952 發(fā)布時(shí)間：2013-10-11
（1）接種單菌落于2ml LB培養(yǎng)液中， 37℃過(guò)。
（2）取0.25ml過(guò)菌入25ml LB培養(yǎng)液中，37℃振搖4～6h至A590=0.4～0.6。
（3）倒入50ml管內(nèi)，水浴10min，以2500～3000rpm離心5min，棄上清。
（4）緩慢加入75mmol/L預(yù)冷CaCl25ml懸浮菌體，冰浴20min，同上離心棄上清。
（5）緩慢加入75mmol/L預(yù)冷CaCl21.0ml輕輕混勻后分裝在1.5ml eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。
2.重組DNA的轉(zhuǎn)化
（1）將3只Eppendorf管按下列轉(zhuǎn)化項(xiàng)目作好標(biāo)記：
（2）冰浴30min至1h。中間搖動(dòng)3次，以防受體菌沉底。
（3）42℃90s。
（4）37℃水浴5min。
（5）加入無(wú)相應(yīng)抗生素的Lb 200μl，混勻后，37℃水浴30～60min。
（6）分別取3組反應(yīng)物各50μl在含相應(yīng)抗生素的固體lb培養(yǎng)基平皿上涂布，室溫下干燥，然后倒置于37℃溫箱中培養(yǎng)過(guò)。