詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | ATP依賴的解旋酶CHD3抗體 |
英文名稱 | CHD3 |
規格 | 0.2ml |
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公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
芫花條英文名稱:Article genkwanin保存:20℃,避光規格:1gras癌基因家族Rab11蛋白一抗
藏菖蒲英文名稱:Acorus calamus L.保存:20℃,避光規格:2gras癌基因家族Rab5蛋白一抗
棉花根英文名稱:Cotton root保存:20℃,避光規格:1.5g視黃醇結合蛋白4一抗
穿心蓮英文名稱:Andrographis paniculata保存:20℃,避光規格:0.5g胰島細胞再生因子ICRF一抗
澤瀉英文名稱:Rhizoma alismatis保存:20℃,避光規格:1g腎素/血管緊張素形成酶Ren1一抗
阿魏英文名稱:Ferulic保存:20℃,避光規格:0.5g分泌性蛋白RSPO1一抗
吳茱萸新、吳茱萸卡品、吳茱萸喹英文名稱:Wu Zhuyu new alkali, alkali, Wu Zhuyu Wu Zhuyu card praziquan alkali保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 10mg/支原癌基因酪蛋白激酶受體RET/多發性內分泌腺瘤和狀腺髓樣癌蛋白一抗
英文名稱:Kaempferol保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支化原癌基因酪蛋白激酶受體RET一抗
莽草英文名稱:Shikimic acid保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支癌基因RAS相關蛋白Rab25一抗
丹參 I英文名稱:Tanshine I保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支胰腺癌轉移相關蛋白RLLM1一抗
二丹參Ⅰ英文名稱:Two hydrogen tanshine I保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支RNA結合基因蛋白3一抗
丹參IIA鈉英文名稱:Sodium tanshine IIA sulfonate保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支維受體γ一抗
隱丹參英文名稱:Cryptotanshine保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支化Rho相關蛋白激酶1一抗
丹A英文名稱:Salvialic acid A保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支核受體RXRβ一抗
丹B英文名稱:Salvialic acid B保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支Ras相關區域家族蛋白4一抗
丹C;丹參C英文名稱:Salvialic acid C; salvialic acid C保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支細胞生長抑制蛋白34
丹參素英文名稱:Danshensu保存:20℃,避光規格:HPLC≥98% 20mg/支Ras樣蛋白家族10A一抗
ATP依賴的解旋酶CHD3抗體A型流感病毒H5N1凝集素抗體Olmesartan medoxomil別名: 分子式: C29H30N6O6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
A型流感病毒核衣殼蛋白抗體Adefovir dipivoxil別名: 分子式: C20H32N5O8P性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
A型流感病毒核衣殼蛋白抗體Candesartan cilexetil別名: 分子式: C33H34N6O6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
A型流感病毒核衣殼蛋白抗體Risperidal別名: 分子式: C23H27FN4O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
B型流感病毒蛋白抗體5-Isoquinolinesulfonic acid別名: 分子式: C9H7NO3S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
人類狀瘤病毒16-E7抗體Homopiperazine別名: 分子式: C5H12N2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
跨膜蛋白酶絲氨1抗體Zolmitriptan別名: 分子式: C16H21N3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
肺癌癌基因蛋白3抗體Olopatadine hydrochloride別名: 分子式: C21H24ClNO3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: