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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321186 |
商品介紹：
測定意義 肝酯酶是脂肪分解酶，在肝實質細胞中合成，存在于肝臟竇周間隙內皮細胞表面和竇周間隙腔面的肝細胞微絨毛表面，可促進脂蛋白中的膽固醇向類固醇激素轉化，血漿中的HL活性增高時，血漿中小顆粒可導致LDL水平升高，加速動脈粥樣硬化的發生。 測定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯產生α-萘酚，可與固藍B鹽形成紫紅色偶氮化合物，在595nm有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內與肝酯酶活性成正相關。 自備實驗用品及儀器 天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
石吊蘭英文名： D-Mannose神經生長相關蛋白43包裝1g
石斛（標準品）英文名： N-Octanoyl-N-methylglucamine3-磷甘油脫氫（兔來源免疫組化用抗體）包裝5g
石斛堿（標準品）英文名： N-Decanoyl-N-methylglucamine 3-磷甘油脫氫單克抗體(內參抗體)包裝1g
石見穿（標準品）英文名： n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside生長停滯特異性蛋白2家族1抗體包裝5g
石椒草（標準品）英文名： D(+)-Raffinose pentahydrateG蛋白偶聯受體97抗體包裝1g
石榴皮（標準品）英文名： D-SorbitolG蛋白結合蛋白7抗體包裝250mg
石榴皮鞣；安石榴林（標準品）英文名： N-Octyl-β-D-glucopyranoside綠色熒光蛋白抗體包裝25g
石榴子（標準品）英文名： L-(+)-Ribose綠色熒光蛋白抗體包裝5g
石杉堿（標準品）英文名： L-(+)-RiboseG蛋白通路抑制蛋白1抗體包裝1g
矢車菊-3-O-葡萄糖苷(標準品）英文名： 2-Deoxy-L-ribose膠質系源性神經營養因子受體α2抗體包裝5g
使君子（使君子仁）（標準品）英文名： 4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews核突觸蛋白-γ抗體包裝1g
首烏藤（標準品）英文名： 2-Deoxy-D-Ribose粒-巨噬克激因子抗體包裝5g
熟地黃（標準品）英文名： D-Galactose還原抗體包裝5ml
鼠尾草（標準品）英文名： D-Galactose胰高血糖樣肽-1抗體包裝1g
鼠尾草（標準品）英文名： Hydrazine dihydrochloride顆粒蛋白前體抗體包裝25g
繩索狀芽孢桿菌Bacillus│funiculus 質量規格：>95%,BR內皮2試劑盒絡石苷;Tracheloside
魯氏不動桿菌Acinetobacter│lwoffii 質量規格：HPLC>95%,標準品內皮1受體試劑盒莨菪堿;L-Hyoscyamine
日本慢生根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質量規格：>99%,BR內皮1試劑盒鐮葉芹二;Falcarindiol
肝脂酶（HL）測試盒50管/24樣Fusarium venenatum Nirenberg N-乙烯基吡咯烷酮肌腱蛋白NElisa
短小芽孢桿 2-乙基丁酸肌腱蛋白XElisa
草木樨中華根瘤 trans-N-tert-Butyloxycarbonyl-4-tosyloxy-L-proline神經生長因子誘導蛋白BElisa
光滑青霉 六Taperin蛋白Elisa
蜂房哈夫尼 2-甲基-3-(三氟甲基)苯甲Talpid3蛋白Elisa
豌豆根瘤 2,5-二氫-6-羥基-2-甲基-5-氧-3-巰基-1,2,4-三新城疫病sIgA抗體Elisa
香菇 5-溴-3-甲幾丁質Elisa
孟氏假單胞 4-基苯乙鎖鏈Elisa
麥根腐平臍蠕孢 1-溴-3-苯氧基烷基質金屬蛋白抑制因子9Elisa
灰葡萄孢* (1S,2S)-(+)-N,N'-二甲基環己烷-1,2-二Tsukushin蛋白Elisa
球孢白僵 間苯甲萊姆病抗體Elisa
克魯斯假絲酵母 4,5-二氟-2-萊姆病IgM抗體Elisa
桑炭疽盤 3-溴-5-氟-4-甲氧基苯高遷移率族AT Hook蛋白2Elisa
乳酸乳球乳亞種 4-乙酰基脂質轉運蛋白2Elisa
粉擬青霉 3-甲氧基溴芐Notch同源物3Elisa
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