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大鼠Jo1抗體;抗組氨酰tRNA合成酶抗體 （ELISA）試劑盒
閱讀：171 發(fā)布時(shí)間：2019-12-30| 提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 30.4KB |
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大鼠Jo1抗體;抗組氨酰tRNA合成酶抗體 （ELISA）試劑盒操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入pbs 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加tmb顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，終測得的od值為兩者之差（w1-w2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）大鼠Jo1抗體;抗組氨酰tRNA合成酶抗體 （ELISA）試劑盒數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（s）和陰性對(duì)照（n）的 od值后，計(jì)算s/n值。s/n≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。