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超微量分光光度計進行核酸定量的應用分析
閱讀：811 發布時間：2022-8-10
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率較高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈DNA、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波長260nm。
由于每種核酸的分子構成不一，因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應消光因子。如：1OD的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。
測試后的吸光值經過上述系數的換算，從而得出相應的樣品濃度。除了核酸濃度，分光光度計顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度，如A260/A280的比值，用于評估樣品的純度，因為蛋白的吸收峰是280nm。
純凈的樣品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。
A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
超微量分光光度計可以像普通的紫外-可見分光光度計一樣行使功能。如BIO-DLMicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值。可以同時指定檢測40個波長下的吸光值并把數據顯示在報告中。