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一次移液操作一般有哪些步驟
閱讀：2940 發布時間：2018-10-30
步：裝吸頭。移液器套柄用力下壓并小幅度旋轉即可
第二步：量程設定
1、移液器量程的設定原則：由大到小！
1)由大量程向小量程調節時：如從600μl調節至400μl，直接調節；
2)由小量程向大量程調節時：先朝所需量程方向連貫旋轉，旋轉到達超過所需量程1/3圈處，回調到所需量程處。如從20μl調節至50μl，先調節至60μl，再回旋至50μl。
注：這是因為由小量程向大量程調節時，彈簧的彈性形變在短時間內無法*回復，需有一個恢復階段，可以想象一下剛從沙發上起身時，沙發墊恢復原狀也是需要一定時間的。
*正確的量程設定可以提高0.5%的移液準確性！
2、量程范圍的選擇
選擇量程時，需要注意，一般在 10%-100% 量程范圍內可以操作，但在 10% 量程操作需要較高的操作技巧。因此建議的佳量程是35%-100% 量程范圍。在此量程范圍，對操作技巧依賴更少，并保證移液的準確性和精度。從表中可以看出，當選擇的量程范圍越小，移液的準確性和重復性就會越差。
*選擇合適的吸頭量程，可提高1%移液準確性！
第三步：潤洗吸頭
用同一樣品對吸頭進行潤洗。先吸取樣品，然后排回樣品池或廢液槽。充分吸液排液2-3次。
潤洗的作用：
1.在吸頭內形成同質膜，降低吸頭對樣品的吸附；
2.有助于提高吸頭多次相同移液操作的一致性。
注意：對于高溫/低溫樣品，由于熱脹冷縮帶來更大的誤差，不建議潤洗。
*潤洗吸頭可提高0.5%的移液準確性!
第四步：吸液
此步影響移液準確性的因素主要有以下4點：
1、吸頭浸入角度：建議盡量保持垂直，傾斜角度不大于15°。
*正確的移液角度，可提高2.5%移液準確性！
2、吸頭的浸入深度：10μl以下的吸頭，浸入深度為1-2mm；10-200μl的吸頭，浸入深度為2-3mm；200-2000μl的吸頭，浸入深度為3-6mm；2000μl以上的吸頭，浸入深度為6-10mm。
*以正確吸頭浸入深度進行吸液操作可提高1%的移液準確性(微量程移液器可達5%)！
3、吸頭浸入時間：吸液后保持吸頭浸入液面少1秒，然后將吸頭平緩移開液面。對吸取大容量樣品或者高粘度樣品尤為重要。
4、吸液速度：吸液通常采用一檔吸液、二擋排液，在吸液時保持平順，緩慢松開活塞，控制好吸液速度。過快的吸液速度，會導致形成氣柱，使移液不準確；樣品液進入套柄，對活塞和密封圈造成損傷；帶入氣霧，造成樣品交叉污染。
*不正確的吸液速度會導致至少5%的準確性下降！
第五步：排液和吹液
先將排液按鈕按至檔(排液檔)，略作停頓以后，再按至第二檔(吹液檔)。
常規排液操作：
1.沿內壁排液(常規)
2.直接排入液面下:直接排入液面排液時要保持活塞下壓再離開液面，否則容易導致倒吸！
3.在液面上方排液
*正確的排液技術提高1%的移液準確性！