培養(yǎng)基的發(fā)展史

   zui初進行細胞培養(yǎng)是使用天然培養(yǎng)基,即組織提取物和體液,例如:雞胚浸出液,血清,淋巴液等.隨著細胞系的不斷增加,對質量更加穩(wěn)定的培養(yǎng)基的需求也不斷地增加,由此出現了化學成分明確的培養(yǎng)基,它是通過對體液成分的分析以及營養(yǎng)生物化學的研究而產生的.Eagle’s Basal Medium[Eagle,1955]以用后繼的Eagle’sMinimal Es-sential Medium （MEM）[Eagle.1959]成為廣泛采用的合成培養(yǎng)基,它們可以添加各種補充成分,如:牛血清,人血清,馬血清,蛋白水解物及胚胎提取物.隨著更多連續(xù)細胞系的出現（L929,Hela等）,各種合成培養(yǎng)基成為培養(yǎng)絕大多數細胞的選擇.在合成培養(yǎng)基的發(fā)展過種有幾點成功之處:可替代血清;針對不同類型的細胞制備zui適宜的培養(yǎng)基（例如:RPMI1640適合于類成淋巴細胞系）;根據特殊的條件修正培養(yǎng)基（例如:Leibovitz L15不需要加入CO2和NaHCO3[Leibovitz,1963]）.

分離和繁殖某種特殊類型的細胞可能需要一種選擇性的無血清培養(yǎng)基;而為了得到產物所進行的細胞培養(yǎng)（例如將細胞作為病毒繁殖的宿主,或將細胞用于非細胞特異性的分子生物學研究）則主要依賴于添加血清的Eagle’s MEM[Eagle1959]以及Dulbecco改良的DMEM[Dulbecco and Freerman,1959]或者是現在更多使用的RPMI1640[Moore et al.,1967].然而許多工業(yè)化生產技術現在使用的是無血清培養(yǎng)基,這樣做有利于產物的下游處理并可減少外來污染.在許多實驗室還流行一種折中的方法:即將一種成分復雜的培養(yǎng)基（例如Ham’s F12[Ham,1965]）與一種氨基酸和維生素含量較高的培養(yǎng)基（例如:DMEM）混合使用.這種培養(yǎng)基不利于純化產物,但對于原代培養(yǎng)以及細胞系的繁殖卻可以產生多方面的促進作用.