血管平滑肌細胞誘導鈣化試劑盒

Vascular Smooth Muscle Cell Calcification Kit

貨號：YJ-YD-005

價格： 1280.0

規格： 200ml

產品信息

產品描述

由團隊精心優化的血管平滑肌細胞誘導鈣化試劑盒，包括適合血管平滑肌細胞鈣化的基礎培養基、鈣化因子和雙抗。

本產品可增強VSMCs細胞的鈣化能力。 本產品僅用于科研用途，不可用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

試劑盒組成部分

使用方法

血管平滑肌細胞誘導鈣化完全培養基的配制

1.   使用前，請將鈣化因子置于2-8℃環境中過夜解凍直至鈣化因子完全溶解，解凍后輕晃試劑瓶以確保鈣化因子混合均勻，隨后即可使用。

注意：解凍后的鈣化因子中可能會含有少量絮狀沉淀，這些物質對產品質量無影響。不建議采取 過濾的方法去除沉淀物，此操作會導致鈣化因子中部分營養物質流失。

2.  用75%乙醇擦拭試劑盒中各瓶/管的開口外壁，室溫放置數秒使酒精揮發。

3. 在超凈臺中無菌地打開以上各瓶/管。

4. 將25 mL鈣化因子和2 mL雙抗全部加入173 mL血管平滑肌細胞誘導鈣化基礎培養基中，即可配 成200  mL血管平滑肌細胞誘導鈣化完全培養基。

注意：

① 無菌吸取少量基礎培養基洗滌各瓶/管，盡可能的將所有組分完整的加入基礎培養基中。

② 輕晃配制好的完全培養基，確保混合均勻之后即可使用。

③ YJ完全培養基試劑盒中的每個成分均為無菌分裝，但為確保完全無菌， 也可以將混合后的完 全培養基進行再次過濾除菌（0.22 μm 濾膜）。

培養器皿表面的包被

為了避免誘導過程中血管平滑肌細胞出現漂浮現象，建議對鈣化誘導使用的培養器皿表面用促貼壁試劑包被。

所需材料

促貼壁試劑（AS01-001D）

操作

1.  加適量促貼壁試劑到培養器皿中，能覆蓋整個培養器皿底面的量即可。

2. 搖勻液體使其覆蓋整個培養器皿的底面。

3.  將鋪有促貼壁試劑的培養器皿放置在超凈臺至少30min。

4.  30 min后棄去促貼壁試劑，待培養器皿晾干后，即可用于接種細胞。

注意: 包被促貼壁試劑的培養器皿在無菌和不蒸干的條件下，可以在4℃保存兩周。

血管平滑肌細胞誘導鈣化操作規程

所需材料

n 0.25% 胰蛋白酶-EDTA

n Phosphate-Buffered Saline (1×PBS) （貨號：YJ-0800）

n 血管平滑肌細胞完全培養基（貨號：PriMed-YJ-004）

n 血管平滑肌細胞誘導鈣化試劑盒（貨號：YJ-YD-004） 操作

注意：本操作規程以六孔板為例

1.  將血管平滑肌細胞置于37℃，5% CO2的培養箱中培養。

2.  當細胞融合度達到80-90%時，用0.25% 胰蛋白酶-EDTA進行消化。

3. 將消化下來的血管平滑肌細胞按照2×104 cells/cm2 的細胞密度接種在事先包被促貼壁試劑的六孔 板中，每孔加入2 mL完全培養基。。

4.  將細胞置于37℃，5% CO2的培養箱中進行培養。

5.   當細胞融合度達到70%左右時，小心的將孔內完全培養基吸走，向六孔板中加入2 mL血管平滑肌細胞誘導鈣化完全培養基。

6.   每隔2-3天換用新鮮的血管平滑肌細胞誘導鈣化完全培養基（使用前需預熱至37℃）

7. 誘導15-20天后，視細胞的形態變化及生長情況，用鈣化鑒定試劑盒進行染色。

注意：為防止誘導后的細胞脫落，建議鈣化過程中出現大量鈣結節之后，換液形式變為每兩天一次半量換液。

產品穩定性及保存條件

1.所有產品均需避光保存。

2.保存條件及有效期

3.所有產品請于保質期內使用，超過保質期，必須放棄使用。

4.為確保產品效果，請避免反復凍融相關產品。

質量控制

血管平滑肌細胞鈣化誘導培養基已用各種屬血管平滑肌細胞進行了性能測試。

主要的鑒定標準包括：

•   無菌檢測（細菌、真菌和支原體檢測）

•   pH測試

•   滲透壓檢測

•   內毒素檢測

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