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夾芯式垂直電泳槽的使用方法

時間:2017/3/14閱讀:2770
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如何使用電泳槽

夾芯式垂直電泳槽使用方法:
一、組成部件
(一)裝有鉑金絲的貯液槽一對,配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。
(二)凹型橡膠框,配有玻璃板,可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板,操作時根據需要選擇適當厚度的玻璃板及梳子配套使用。
(三)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣。
(四)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對,28D、30型為5對。
(五)橡膠管五根。兩根長的用于連接冷卻水的出入口;中等長度的兩根用于連接電極緩;中液的流出口;較為短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水。
(六)導線1付。二、使用方法
(一)清洗部件
上述部件組裝前要*清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑*清洗干凈。清洗后的玻璃板應放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。
(二)組裝電泳槽
A、1、將四只固定螺桿插進一只貯液框(半上槽)的相應孔洞中,然后將貯液框仰放在桌上。
2、左手拿凹型槽橡膠模框,右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側邊緣插到橡膠模框內 (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)。
3、將帶有玻璃的橡膠模框子放在仰放的貯液槽框架上,其下緣必須對齊貯液槽框下緣。
4、雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機玻璃框中央。
5、裝上四只螺母,擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時用力應均勻,用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊。
6、將電泳槽垂直豎起,放在桌上,帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰),帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽),在長玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長玻璃板下端灌入,為防止留存氣泡,可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂*凝固后才能灌膠。
B、也可將槽垂直豎起,將帶有玻璃的橡膠模框直接放入槽中,對稱擰緊螺絲后,用瓊脂封底邊。
(三)灌膠
1、先灌分離膠,待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。
2、用細頭滴管吸取膠液,沿長、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產生氣泡,可稍拾起另一端(氣泡往高處走),不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,輕輕加少許水,雙手輕輕將梳子插入,待膠凝后就可形成凹形加樣孔。
3、為防止漏膠,在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水,但蒸餾水不能*過短玻璃板上緣。
4、膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折
射率不同的亮區。
(四)加樣
1、松開連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,放掉槽內的蒸餾水,待水流完后,再夾緊夾子。
2、雙手輕輕取出樣品梳子,即可看到界線清楚的加樣孔,將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面)。
3、在上、下貯液槽中加入緩;中液,液體高度應*過上貯液槽短玻璃板上緣。
4、用微量注射器吸取一定量的樣品加到長、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(注意加樣動作要輕,針頭不能碰壞膠面)。
(五)電泳
一貯液槽導線與電泳儀的負極相連,下貯液槽導線與電泳儀的正極相連。檢查線路無誤,方可按照所要求的電壓電流進行電泳。


 

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