詳細(xì)介紹
elisa原理 檢測試劑盒 人表面膜免疫球蛋白M試劑盒
產(chǎn)品名稱:人表面膜免疫球蛋白M試劑盒
英文名稱:Human membrane IgM,mIgM ELISAKIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
保存條件:2-8℃
檢測原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
實驗方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
測試劑盒檢測原理
ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒 的測試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
3.組織處理:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
ELISA所用抗原有三個來源:天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于動物組織或體液、微生物培養(yǎng)物等,一般含有多種抗原成分,需經(jīng)純化,提取出特定的抗原成分后才可應(yīng)用,因此也稱提純抗原(purifiedantigen)。重組抗原(recombinantantigen)和多肽抗原(peptideantigen)均為人工合成品,使用安全,而且純度高,干擾物質(zhì)少。因此雖然制備合成抗原有較高的技術(shù)難度且要求較為昂貴的儀器設(shè)備和試劑,其應(yīng)用仍十分普遍,特別是對那些天然抗原不易得到的試驗,更顯出其獨到之處。
用于ELISA的抗體有多克隆的和單克隆的。抗血清成分復(fù)雜,應(yīng)從中提取IgG才可用于包被固相或酶標(biāo)記。含單克隆抗體的小鼠腹水中的特異性抗體含量較高,有時可適當(dāng)稀釋后直接進(jìn)行包被。制備酶結(jié)合物用的抗體的質(zhì)量往往要求有較高的純度。經(jīng)硫酸銨鹽析純化的IgG可進(jìn)一步用各種分子篩層析提純。也可用親和層析法提純特異性IgG,如用酶消化IgG后提取的Fab片段,則效果更好。
上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力已迅速成為集科研和生產(chǎn)為一體的專業(yè)化生物工程公司。特別是ELISA研發(fā)這一產(chǎn)品已使上海恒遠(yuǎn)成為中國公司。
公司產(chǎn)品涵蓋生物培養(yǎng)基、人ELISA試劑盒、小鼠ELISA試劑盒、大鼠ELISA試劑盒、ELISA研發(fā)、細(xì)胞培養(yǎng),各種生化試劑、各種酶類、分子生物學(xué)試劑盒、培養(yǎng)基等。此外、上海恒遠(yuǎn)還代理了Amresco,R&D,RB,sigma,IBL,Santa cruz,wako,omega,ATCC,ScienCell,Bioworld,Spectrum等國外各類公司的產(chǎn)品。
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