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ELISA試驗做復孔問題介紹

閱讀:3317          發布時間:2015-5-25

徐州醫學院附屬醫院崔老師由同事介紹我公司,老師想做小鼠IL-6等相關指標的ELISA試驗,老師介紹到樣本量收集的較少(18個樣本,總共分了6組。不同組的樣本是不同藥物處理的),而試劑盒的zui小規格就是48T(48T可以檢測37個樣本,11孔做標準空白對照孔),我司銷售專員建議老師實驗可以做個復孔,這樣的實驗報告結果會更加。

崔老師聽取了我司銷售專員的建議,在設計ELISA復孔檢查時,提出問題:是對同一個樣品作兩次稀釋,再分別加到板上的兩個孔,還是只稀釋一次,然后吸取兩次分別加到兩個孔?前者似乎把稀釋時的誤差也考慮到了,但做出來的結果兩個孔相關挺大的。

我司技術答復:

采用后者。如果在實驗室階段,可能需要多次稀釋,然后將不同稀釋次數的分別做復孔,以便檢查稀釋過程中帶來的誤差;如果同一次稀釋的復孔一致的存在檢測差異大,可能ELISA板的均一性存在一定問題(排除操作因素)。如果不同稀釋次數差異大,說明稀釋方法有問題。

在ELISA實驗中設復孔,目的是為了減少本次實驗的系統誤差對實驗數據帶來的影響,所以應該用第二種,有條件的話復孔的數量可以增加,系統誤差更小。

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