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上海恒遠生物科技有限公司>公司動態>上海恒遠:雞白介素2ELISA試劑盒放價熱賣中!

公司動態

上海恒遠:雞白介素2ELISA試劑盒放價熱賣中!

閱讀:1166          發布時間:2012-7-17

產品名稱:雞白介素2ELISA試劑盒 

樣品形式:血清/血漿/細胞培養上清/其它生物液體(具體情況請咨詢)
保存與運輸:短期4℃/長期-20℃保存
應用范圍:科研用檢測試劑
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存:2-8℃               

 雞白介素2ELISA試劑盒 操作注意事項

 
●   試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
●   實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
●   不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
●   使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
●   使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
●   底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
●   加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
●   按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 
 
安全性
 
1.   避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.   實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.   不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
 
試劑的準備
 
1.   標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
300
pg/ml
(6號標準品)
原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
150
pg/ml
(5號標準品)
100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
75
pg/ml
(4號標準品)
100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
37.5
pg/ml
(3號標準品)
100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
18.5
pg/ml
(2號標準品)
100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
9.25
pg/ml
(1號標準品)
100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0
pg/ml
(空白對照)
原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
 
 
2.   洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
 
試劑盒性能
 
1.   靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2.   特異性:不與其它細胞因子反應。

3.   重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
 
雞白介素2ELISA試劑盒操作步驟

 
1.   使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.   根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.   加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
4.   甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.   甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.   每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
8.   取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.   在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
結 果 判 斷 與 分 析
 
1、 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的IL-2標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的IL-2含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
3、 檢測值范圍: 0-300pg/ml
4、 敏感度:1.0pg/ml

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