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大鼠sEPCR-大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體試劑盒
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  • 大鼠sEPCR-大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體試劑盒

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貨物所在地: 上海上海市
地: 美國
更新時間: 2025-05-26 21:00:08
期: 2025年5月26日--2025年11月26日
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產品簡介

上海恒遠公司提供美國進口“大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體試劑盒",各種標本、種屬、具體指標齊全,品種多,質量好,靈敏度高,詢價或在線咨詢。

詳細介紹

大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體試劑盒  大鼠sEPCR大鼠elisa試劑盒

產品名稱:大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體試劑盒          

各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標本齊全:血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液、關節液、胸腔溢液等…
檢測方法:酶聯免疫法/酶免法(ELISA)

大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體試劑盒【注意事項】

1. 從-20℃取出的試劑盒,在4℃解凍過夜。盒內每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻,避免解凍時出現的分層,否則會出現濃度不均一的現象。

2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。

3. 配制各種試劑時,切記混勻!

4. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。

5. 建議所有豬IL-1β標準品、樣本都做雙份檢測。

6. 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活!

7. 為免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和試管。

【洗板方法】

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.35ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

【樣品的準備和保存】

樣品如果不立即分析,應分裝后冷凍保存,且避免反復凍融。

血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固2小時或4℃過夜,離心1000×g 10分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細胞培養、組織勻漿、體液——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

【樣品稀釋的一般原則】

用戶須查閱文獻了解標本內待測因子的含量,決定適當的稀釋倍數,以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA試劑盒的*檢測范圍。樣品的稀釋應有詳細記錄。

【試劑的準備和保存】

A. 豬IL-1β標準品的稀釋和使用:在使用前2小時內準備。將凍干品管內加入1ml樣品稀釋液,*溶解后做倍比稀釋。

稀釋后的豬IL-1β標準品在2小時內使用。

B.生物素標記豬IL-1β抗體工作液:在使用前2小時內準備。

1. 根據每孔需要0.1ml計算總的用量(實際配制時應多配制0.1-0.2ml)。

2. 按10ul生物素標記豬IL-1β抗體加豬IL-1β抗體稀釋液990ul的比例配制工作液。輕輕混勻。

C.親和素-過氧化物酶復合物(ABC)工作液的準備:在使用前1小時內準備。

1. 根據每孔需要0.1ml計算總的用量(實配時應多配制0.1-0.2ml)。

2. 按10ul親和素-過氧化物酶復合物(ABC)加ABC稀釋液990ul的比例配制工作液。輕輕混勻。

D. TMB顯色工作液的準備:在使用之前30分鐘,按TMB顯色液A 9份加 TMB顯色液B 1份的比例配制TMB顯色工作液。

【操作程序】

1. 確定本次檢測所需的已包被豬IL-1β抗體的酶標板孔數目。

2. 將倍比稀釋的豬IL-1β標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔加入。

3. 酶標板加上蓋,37℃反應90分鐘。

4. 反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體;或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。

5. 將準備好的生物素豬IL-1β抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應60分鐘。

6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。

7. 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應30分鐘。

8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。

9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應,反應過程中,要經常的觀察,當肉眼可見豬IL-1β標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯時,即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應zui長不要超過30分鐘)。

10. 用酶標儀在450nm測定O.D.值。

11. 根據樣品的吸光值在坐標上找出對應的濃度。用戶也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應該×N。

【操作程序總結】:

準備試劑,樣品和豬IL-1β標準品

加入準備好的樣品和豬IL-1β標準品,37℃反應90分鐘

洗板2次,加入生物素化豬IL-1β抗體工作液,37℃反應60分鐘

洗板3次,加入ABC工作液,37℃反應30分鐘

洗板5次,加入TMB顯色液,37℃反應

加入TMB終止液

30分鐘之內讀OD值

計算標本待測因子含量

 

【檢測范圍】:1000pg/ml→15.6pg/ml。

【敏感性】: <5pg/ml

【特異性】: 系統和其它細胞因子無交叉反應。

【保存】: -20℃ [短期內(如兩周)可4℃]

【有效期】: 12個月(-20℃)。

【用途】: 用于體外定量分析液體標本(通用型)。

 

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