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大鼠骨成型蛋白受體1A試劑盒
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貨物所在地: 上海上海市
地: 美國
更新時間: 2025-05-26 21:00:08
期: 2025年5月26日--2025年11月26日
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產品簡介

“大鼠骨成型蛋白受體1A試劑盒"上海恒遠生物現貨供應,保證質量,檢測方法:酶聯免疫法/酶免法(ELISA),“"含稅含運費,免費提供實驗代測服務。:。

詳細介紹

產品名稱:大鼠骨成型蛋白受體1A試劑盒             

各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標本齊全:血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液、關節液、胸腔溢液等…
檢測方法:酶聯免疫法/酶免法(ELISA)
產品用途:For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務.

標本的采集及保存 

1. 組織勻漿: 將動物的組織標本先用PBS洗滌,去除多余血液,勻漿化后放在20mlPBS中于-20° C放置過夜,第二天,經過二次反復凍融破膜,將勻漿物5000x g離心5分鐘,取上清即可檢測。

2. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

注:以上標本置4℃保存應小于1周,-20℃或-80℃均應密封保存,-20℃不應超過1個月,-80℃不應超過2個月;標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測;高血脂的標本不需進行特殊處理,可直接檢測。

操作步驟

實驗開始前,請提前配制好所有試劑;試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,均應用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。建議各實驗室在操作前先進行預實驗以建立*稀釋倍數。

1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100ul,余孔分別加標準品或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。

為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100ul(在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 

4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100ul,37℃,60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進行檢測。

注:

1. 每次實驗留一孔作為空白調零孔(不同于空白孔),該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。 

2. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室 溫。使用后立即冷藏保存試劑。

3. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入檢測溶液B或底物前確保盡量吸干孔內液體。為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,避免酶標板長時間處于干燥狀態。

4. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

5. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

6. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,請精確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10ul),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;檢測液A、B,以及底物溶液在使用前,應置于37℃溫育30分鐘;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

7. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。

大鼠骨成型蛋白受體1A試劑盒,BMPR-1A ,elisa說明書

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