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食物過敏原的實驗室檢測
閱讀：3320 發布時間：2011-10-25| 一、雙盲食物激發試驗： 雙盲食物激發試驗為診斷食物過敏的金標準，主要用于以下情況： （1）幾種食物同時被懷疑為過敏原且特異性IgE（sIgE）陽性，為減少患者禁食種類時可使用； （2）高度懷疑某一過敏物，但無sIgE抗體的證據，為進一步確定進食該食物的安全性時使用； （3）非IgE介導型食物過敏者多用該方法。患者應先進行排除飲食，然后施以食物刺激，在操作過程中為控制偏倚，可不讓患者知道進食食物的種類或使用安慰劑，但對反應較嚴重的IgE陽性的過敏原。不宜做該試驗。由于該試驗有一定危險性，且近年來有證據表明定量IrE檢測可預測DBPCFC的試驗結果，結合臨床病史多數食物過敏可得到確診，故真正需進行DBPCFC的患者并不多。 二、皮膚針刺試驗（SPT） SPT為臨床常用的檢測過敏原特異性IrE的體內試驗。具體方法為用稀釋抗原液點刺皮膚，同時進行陰、陽性對照，15min后觀察檢測點是否出現風團或潮紅反應，如風團直徑超過陰性對照3mm則為陽性，表明存在與過敏原IgE結合的肥大細胞。SPTzui顯著的優點是價格便宜，快速，而且可讓有疑心的患者看到結果；但許多因素如季節，測試時間，待測區域，藥物等都會影響其結果，且所用的蔬菜、水果等過敏原提取物缺乏穩定的蛋白，故該法的重現性較差。同時，不同地區及醫院所檢測的過敏原種類、濃度、判別標準及質控措施有很大差別，這使醫院間共用結果受到限制。 三、體外IgE檢測 與體內試驗相比，體外檢測具有效能參數可靠，不受藥物影響，無全身反應危險等優點，在下列情況下：（1）對過敏原極度敏感；（2）皮膚異常；（3）患者服用干擾皮膚反應的藥物；（4）患者不合作或拒絕皮膚檢測；（5）患者處于嚴重過敏反應后由于巨細胞介質耗盡所致的不應期。近年來，體外sIgE檢測技術有了很大的發展。 1.放射過敏原吸附試驗（RAST）：RAST為zui早使用的過敏原檢測方法。其主要原理是將過敏原結合到固定相，加入待測血清及參考對照，血清內存在的過敏原-slgE將吸附在固定相上，通過用放射性同位素標記的抗IrE二抗來檢測血清中的sIgE。由于該法費用昂貴，花費時間長，放射性同位素易過期且污染環境，不同來源試劑盒的參比血清不同而不易相互比較，待檢血清含有相同特異性IgG時可干擾正常結果，故目前已逐漸被測定帽（CAP）過敏原檢測法所代替。 2.測定帽（CAP）過敏原檢測系統是目前上廣泛應用并*較為可靠的過敏原定量體外檢測系統，主要原理為酶聯免疫熒光測定法（FEIA）。CAP系統建立于新型固體相——裝在小膠囊中的親水性載體聚合物上，由一種經溴化氰活化的纖維素衍生物合成，與過敏原有*的結合能力。其過程為將50標準血清或患者血清加入到固有相，再將酶標抗IgE二抗加入到固有相中，zui后測定熒光并與標準曲線比較。CAP過敏原檢測法測定范圍為0.35～100KU^／L（A：allergensIgE），變異系數（CV）<10％。通常以sIgE>0.35KU^／L為臨界點（即陽性反應），其陰性預報正確率達95％，敏感性也高達94％～100％，但其特異性較差，陽性預報正確率（PPV）則更低。若根據情況調整臨界點，則可提高其特異性和PPV，該系統可分析常見的6種食物過敏原：雞蛋、牛奶、花生、大豆、小麥和魚。 3.進口試劑和方法：這些方法的儀器試劑都很昂貴。 4.生物芯片：近年來，漸趨成熟的蛋白質芯片技術因其高通量、微型化、平行性檢測等優點，正越來越多的應用于藥物篩選、腫瘤標志篩查J、臨床檢測等領域，被看作是zui有前景的診斷工具。盡管近年來蛋白芯片檢測過敏原有了很大發展，但有幾個問題仍需解決：（1）玻璃基質本身的缺陷、芯片表面微塵的聚集及去濕化使蛋白芯片極易產生人為信號，而這些干擾信號是操作者不能簡單識別的，因此，必須建立嚴格的標準以評估結果；（2）蛋白芯片點樣不準確，批間差異較大，這還需通過點樣技術的提高來克服。 四、生物共振技術 目前，生物共振技術在食物過敏原檢測中的應用受到越來越廣泛的關注。過敏是一種生物物理信息現象，該現象在人體內產生需要過敏印痕的出現，這種過敏印痕來源于物質與人體的多次接觸，然后逐漸產生基于物質信息的生物物理印痕，一旦人體產生了這種印痕信息，它就可能被維持并處于休眠狀態，當再次接觸過敏源時印痕被激活，并進而通過生物物理脈沖誘發常見的變態反應疾病。每種過敏印痕的信息是此種過敏原惟一的生物物理共振模式，使用共振技術可將致敏信號檢測出來。 |