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技術(shù)文章

ELISA顯色淡原因的這些錯(cuò)誤步驟你中招了嗎

閱讀:1671          發(fā)布時(shí)間:2015-4-1

    昨天下午,有位客戶致電我司業(yè)務(wù)員咨詢ELISA顯色淡的原因及解決方法。問(wèn)題解決之后,我司業(yè)務(wù)員將具體內(nèi)容整理出,在這里分享給大家。這些個(gè)造成ELISA顯色淡原因的這些錯(cuò)誤步驟你中招了嗎?

● 可能原因

   1.試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高;

   2.試劑盒未充分平衡;

   3.培養(yǎng)箱溫度不足37℃;

   4.保溫時(shí)間不足;

   5.洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加;

   6.移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔;

   7.蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題;

   8.底物作用時(shí)間不足。

● 解決方法

   1.盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫;

   2.試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃);

   3.注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開(kāi)啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意;

   4.校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí);

   5.按說(shuō)明書(shū)要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù);

   6.校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用;

   7.使用新鮮合格的蒸餾水;

   8.準(zhǔn)確定時(shí)。

另外還有一個(gè)相關(guān)重點(diǎn)問(wèn)題值得討論,上海恒遠(yuǎn)技術(shù)員特別說(shuō)明:①顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說(shuō)明操作即可。一般來(lái)說(shuō),顯色時(shí)間過(guò)短,結(jié)果偏低;②顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),空白增高或者非特異性顯色增加。

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