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超高回收率的試劑盒恒遠提供
閱讀:2034 發(fā)布時間:2014-9-3
超高回收率的酶聯免疫試劑盒上海恒遠提供:
將天然蛋白混入到血清、血漿樣本中進行檢測,檢測結果更準確。板內和板間差都進行了嚴格控制,確保樣品檢測結果的可重復性。我公司試劑盒*,質量保證,并提供全面的售后服務和。擁有嚴格的質檢體系:靈敏度、特異性、平行性、線性、回收率、重復性等至少6種指標的質量控制。
酶聯免疫原理:
1. 使抗原結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
2. 使抗原與某種酶聯結成酶標抗原,而且此酶標抗原既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
3. 測定時將受檢標本和酶標抗原按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應,再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其它物質分開,zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;
4. 再加入酶反應底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a物,根據其顏色反應的深淺進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時常可見到一些錯誤結果。
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ELISA的類型(雙抗體夾心法):
1. 將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2. 加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。
3. 加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4. 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。
在臨床檢修中,此法合用于檢修各種蛋白質等大分子抗原。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,作一步法檢測。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結合物。
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阻斷ELISA:
本法主要用于檢測型特異性抗體。該方法現已成為豬傳染性胃腸炎(TGE)、豬偽狂犬病(PR)及豬胸膜肺炎(AP)的主要檢測方法。
下面以AP2型抗體的阻斷ELISA檢測法為例介紹其操作程序:
① 100μl AP2型工作量抗原包被→4℃放置一個晚上,洗滌三次、拋干
② 用200μl阻斷緩沖液進行封閉→37℃60分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl→37℃60分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清→37℃30分鐘,洗滌三次、拋干
⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP→37℃60分鐘,洗滌三次、拋干
⑥ 加100μl OPD底物液→37℃20分鐘,加終止液
⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。
本試驗同時設標準陰、陽性血清對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。