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如何做好ELISA實驗?
閱讀：1307 發布時間：2021-1-29在生產過程中，不同批次的試劑的質量，保證*一致非常困難，ELISA試劑盒甚至通過批檢驗項目和結果也不同，因此必須選擇和訂購試劑長批次，并確保小鼠ELISA試劑盒保存條件。嚴格執行本標準可以避免因試劑批號變化與質量控制系統和復雜的過程，重新評價試劑重新建立，并能保證結果的穩定性；有效期短，使用率低的試劑，應小包裝，包裝，可每次都是采取，以避免重復凍融破壞試劑引起的。
在Elisa試劑盒的使用過程中常見問題有很多如， 加樣器不確；尤其10ul以下的加樣器，對結果影響很大； 保溫設備不良； 洗滌用水不規范。
如何解決這些問題呢：
1在使用過程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進口產品（芬蘭、法國等）；
2 仔細校正溫度到37℃，水浴箱為佳；
3 必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等；
4 認真閱讀使用說明書。
樣品加樣：
1 加樣不準確； 2 沒有混勻。 加樣時一定要仔細。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。
2 加樣后，反復抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導致非特異性吸附。 洗滌 洗滌不* ①每次注水洗滌，應靜止30秒鐘；②選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內水分；
3 可選用塑料洗滌瓶。 加酶反應 漏加 滴加后，認真檢查各孔 結果判斷 ①包括陰性對照孔在內，各孔顯色普遍偏深；②包括陽性對照在內，各孔均無顯色；③陽性對照不顯色，而其它樣本顯色正常；
4 有些標本顯色不深，判斷陽性困難。 ①可能是洗滌不充分；加樣過量；溫育時間過長溫度過高；按說明書重新操作。如無改善， 可與生產廠家聯系；②可能是漏加樣本或酶液；溫育時間過短溫度過低；試劑保存不當活性下降；按說明書重新 操作。如無改善，可與生產廠家聯系；③陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善，可與廠家聯系，索要對照品； ④重新操作。使用酶標儀，測定光吸收度，按P/N值標準判斷。 ELISA試劑盒保存 保存不規范 一定要在2-8℃存放。不得過高，也不得凍存（凍存后，酶液將失效）。 對照品 對照品為凍干品 按對照管標示，加入相應體積的去離子水或蒸餾水復溶，充分溶解混勻。可按說明書使用。
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