FCM在生命科學(xué)中的應(yīng)用,標志著細胞生物學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)等進入了細胞和分子水平的研究。為從微觀認識細胞及橫向比較特征提供了精密、準確的方法和儀器。

 

 

　　1、流式細胞儀系統(tǒng)流程：

 

標本→激光系統(tǒng)→流動系統(tǒng)→信號處理系統(tǒng)→放大系統(tǒng)→計算機系統(tǒng)→結(jié)果打印

 

　　2、基本原理：

 

　　待測標本制備成單細胞懸液通過熒光染色后進入充滿鞘液的流動室，鞘液壓力與樣品流壓力是不同的，當二者的壓力差異達到一定程度時，鞘液裹挾著樣品流中細胞排成單列逐個經(jīng)過激光聚焦區(qū)。如果我們將細胞中感興趣的部分特異性的標上熒光染料，那麼這些染料將在細胞通過激光檢測區(qū)時受激光發(fā)出特定波長的熒光,通過一定波長選擇通透性的濾色片,我們可將不同波長的散射光、熒光信號區(qū)分開來，并送到不同的光電倍增管中，經(jīng)過一系列的信號轉(zhuǎn)換、放大，數(shù)字化處理，我們就可以在計算機直觀的統(tǒng)計染上各種熒光染料的細胞各自的百分率。選擇不同的單克隆抗體及熒光染料，我們可以利用FC同時測定一個細胞上的多種不同特征;如果對具有某種特征的細胞有興趣，我們還可以利用流式的分選功能將其分選出來，以便進一步培養(yǎng)、研究。

 

　　3、意義：

 

　　FCM與單克隆抗體結(jié)合，可對細胞表面和細胞內(nèi)抗原、癌基因蛋白及膜受體進行定量檢測，成為臨床檢驗與研究的重要指標。流式免疫熒光技術(shù)不僅能將表達位點的細胞群區(qū)分開來，而且還能進一步區(qū)分各細胞亞群。對免疫功能障礙、造血系統(tǒng)疾病及惡性腫瘤的研究、診斷、治療和預(yù)后評估都能起到重要作用。