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對細胞體外培育的二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方法以及注意事項

閱讀:1004        發(fā)布時間:2014-3-27
  對細胞體外培育的二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方法以及注意事項 
  二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過在培養(yǎng)箱箱體內模仿構成一個相似細胞/安排在生物體內的成長環(huán)境,培養(yǎng)箱需求安穩(wěn)的溫度(37°C)、安穩(wěn)的CO2水平(5%)、安穩(wěn)的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/安排進行體外培育的一種設備。
  二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過在培養(yǎng)箱箱體內模仿構成一個相似細胞/安排在生物體內的成長環(huán)境,如安穩(wěn)的溫度(37°C)、安穩(wěn)的CO2水平(5%)、安穩(wěn)的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/安排進行體外培育的一種設備。
  二氧化碳培養(yǎng)箱運用規(guī)模
  其廣泛運用于細胞、安排培育和某些格外微生物的培育,常見于細胞動力學研討、哺乳動物細胞分泌物的搜集、各種物理、化學要素的致癌或毒理效應、抗原的研討和出產(chǎn)、培育雜交瘤細胞出產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細胞、安排工程、藥物挑選等研討范疇。
  用戶的需求
  用戶對二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條zui基本的需求:
  一是需求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠對溫度、二氧化碳濃度和濕度供給zui安穩(wěn)的操控,以便于其研討作業(yè)的發(fā)展;
  二是需求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠對培養(yǎng)箱內的微生物污染進行有用的防備,并且能夠守時消除污染,以維護研討成果,避免樣品丟失。
  二氧化碳培養(yǎng)箱微處置操控體系  
  微處置操控體系是堅持培養(yǎng)箱內溫度、濕度和CO2 濃度穩(wěn)態(tài)的操作體系。微處置操控體系和其它各種功用附件(如高低溫主動調理和警報設備、CO2警報設備、密碼維護設置等)的運用,使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和操控都十分的簡潔。
  如:LEEC 的PID 微處置器觸摸屏操控體系,它能嚴格操控氣體的濃度并將其損耗降低水平,以確保培育環(huán)境安穩(wěn)不變,且能確保長期培育進程中箱內溫度,并有液晶顯現(xiàn),圖形化進程監(jiān)控、干涉事情記載等。此外報警體系也是不行少,它能讓你及時曉得培養(yǎng)箱呈現(xiàn)的情況,并做出反響,然后zui大極限地降低了丟失,確保實驗的接連性。有些培養(yǎng)箱有聲/光報警設備,溫度改動達±0.5℃,或CO2 濃度改動達±5%時,即會主動報警;有些具有CO2 濃度反常報警顯現(xiàn)功用;有些具有低壓、斷電報警功用。這些設備都是為了便利運用者,以削減繁瑣單調的實驗進程而規(guī)劃的。
  二氧化碳培養(yǎng)箱加熱方法  
  氣套式加熱和水套式加熱,兩種加熱體系都是和牢靠的,一起它們都有著各自的長處和缺陷。
  水套式加熱
  水套式加熱是經(jīng)過一個獨立的水套層圍住內部的箱體來堅持溫度安穩(wěn)的,其長處:水是一種*的絕熱物質,當遇到斷電的時分,水套式體系就能夠對比長期的堅持培養(yǎng)箱內的溫度性和安穩(wěn)性,有利于實驗環(huán)境不太安穩(wěn)(如有用電約束或常常停電)的用戶選用。
  氣套式加熱是經(jīng)過遍及箱體氣套層內的加熱器直接對內箱體進行加熱的,又名六面直接加熱。
  氣套式與水套式對比,具有加熱快,溫度的康復比水套式培養(yǎng)箱敏捷的特色,格外有利于短期培育以及需求箱門頻頻開關取放樣的培育。此外,關于運用者來說氣套式規(guī)劃比水套式更簡略化(水套式需求對水箱進行加水、清空和清潔,并要常常監(jiān)控水箱運作的情況,還有潛在的污染危險)。
  三氣培養(yǎng)箱是一臺新式的高氧培養(yǎng)箱,它的首要技能參數(shù)為:
  1. 控溫規(guī)模 室溫 +3℃~45℃(例:室溫25℃,則控溫規(guī)模為28℃~70℃)
  2. 恒溫操控精度 ±0.2℃
  3. 溫度均勻性±0.2℃
  4. O2濃度操控規(guī)模1%--50%(可抵達98%)(N2濃度=100%—CO2濃度—O2濃度)
  5. O2濃度操控精度 0~5%時為±0.2%,5%~20%時為±0.3%
  6. CO2濃度操控規(guī)模 0%--20%
  7. CO2濃度操控精度 0~5%時為±0.2%,5%~20%時為±0.3%
  8. 電源 220V 50HZ
  9. 功率 小于450W
  10. O2濃度正常下降至置定值的時刻小于10分鐘(O2濃度為1%時)
  11. CO2濃度正常上升至置定值的時刻小于10分鐘(CO2濃度為5%時)
二氧化碳培養(yǎng)箱
  二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度操控  
  二氧化碳濃度能夠經(jīng)過紅外傳感器(IR)或熱導傳感器(TC)進行丈量。兩種傳感器各有優(yōu)缺陷。
  熱導傳感器
  熱導傳感器監(jiān)控CO2濃度的作業(yè)原理是根據(jù)對內腔空氣熱導率的接連丈量,輸入CO2氣體的低熱導率會使腔內空氣的熱導率發(fā)作改動,這樣就會發(fā)作一個與CO2濃度直接成正比的電信號。
  TC操控體系的一個缺陷即是箱內溫度和相對濕度的改動會影響傳感器的度。當箱門被頻頻翻開時,不只CO2濃度,溫度和相對濕度也會發(fā)作很大的動搖,因而影響了TC傳感器的精度。當需求的培育條件和頻頻敞開培養(yǎng)箱門時,此操控體系就顯得不太適用了。
  紅外傳感器
  紅外傳感器(IR)它是經(jīng)過一個光學傳感器來檢測CO2水平的。IR體系包含一個紅外發(fā)射器和一個傳感器,當箱體內的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的有些紅外線之后,傳感器就能夠檢測出紅外線的削減量,而被吸收紅外線的量正巧對應于箱體內CO2的水平,然后能夠得出箱體內CO2的濃度。由于IR體系是經(jīng)過紅外線削減來斷定箱內CO2濃度,而箱體內顆粒物能夠反射或有些吸收紅外線,使得IR體系對箱體內顆粒物的多少對比靈敏,IR傳感器運用在進氣口具有HEPA空氣過濾器的培養(yǎng)箱較適宜。
  二氧化碳培養(yǎng)箱相對濕度  
  箱內濕度關于培育作業(yè)來說是一項十分重要但是又常常被疏忽的要素。堅持滿意的濕度水平并且要有滿意快的濕度康復速度(如在開關門后)才干確保不會由于過度枯燥而致使培育失利。
  當前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過增濕盤的蒸騰作用發(fā)作濕氣的(其發(fā)作的相對濕度水平可達95%左右,但開門后濕度康復速度很慢)。盡量挑選濕度蒸騰面積大的培養(yǎng)箱,由于濕度蒸騰面積越大,越簡略抵達zui大相對飽和濕度并且開關門后的濕度康復的時刻越短。
  二氧化碳培養(yǎng)箱
  二氧化碳培養(yǎng)箱
  二氧化碳培養(yǎng)箱污染物的操控  
  污染是致使細胞培育失利的一個首要要素,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們規(guī)劃了多種不一樣的設備去削減和避免污染的發(fā)作,其首要路徑都是盡量削減微生物能夠成長的區(qū)域和外表,并主動掃除污染設備來有用避免污染的發(fā)作。
  例如,鑒于CO2培養(yǎng)箱在運用進程中有時會伴有霉菌成長,為確保培養(yǎng)箱免受污染且確保儀器箱體內的生物清潔性,有些公司開發(fā)規(guī)劃了帶有紫外消毒功用的CO2培養(yǎng)箱;還有公司規(guī)劃HEPA濾器能過濾培養(yǎng)箱內空氣,可過濾除掉99.97%的0.3um以上的顆粒;此外,主動高溫熱空氣滅菌設備能使箱內溫度抵達高溫(如200℃)然后殺死一切污染微生物,乃至芽孢等耐高溫微生物,這些設備關于細胞培育來說是更有安全確保的。
 二氧化碳培養(yǎng)箱運用注意事項 
  1、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能翻開電源開關,否則會損壞加熱元件。
  2、培養(yǎng)箱運轉數(shù)月后,水箱內的水因蒸騰能夠削減,當?shù)退恢甘緹?WLow12)亮時應彌補加水。先翻開溢水管,用漏斗接橡膠管從注水孔彌補加水使低水位指示燈平息,再計量彌補加水(CP-ST200A加水1800ml,CP-ST100A加水1200ml),然后阻塞溢水孔。
  3、二氧化碳培養(yǎng)箱能夠做高精度恒溫培養(yǎng)箱運用,這時須封閉CO2操控體系。
  4、由于CO2傳感器是在飽和濕度下校對的,因而加濕盤有必要時刻裝有滅菌水。
  5、當顯現(xiàn)溫度超越置定溫度1℃時,超溫報警指示燈(OverTemp7)亮,并發(fā)出尖利報警聲,這時應封閉電源30分鐘;若再翻開電源(溫控)開關(Power20)依然超溫,則應封閉電源并報修理人員。
  6、鋼瓶壓力低于0.2MPa時應替換鋼瓶。
  7、盡量削減翻開玻璃門的時刻。
  8、假如二氧化碳培養(yǎng)箱長期不必,封閉前有必要鏟除作業(yè)室內水分,翻開玻璃門通風24小時后再封閉。
  9、清潔二氧化碳培養(yǎng)箱作業(yè)室時,不要磕碰傳感器和拌和電機風輪等部件。
  10、拆裝作業(yè)室內支架護罩,有必要運用隨機扳手,不得過度用力。
  11、轉移培養(yǎng)箱前有必要掃除箱體內的水。排水時,將橡膠管緊套在出水孔上,使管口低于儀器,悄悄吸一口,放下水管,水即虹吸流出。
  12、轉移二氧化碳培養(yǎng)箱前應拿出作業(yè)室內的擱板和加濕盤,避免磕碰損壞玻璃門。
  13、轉移培養(yǎng)箱時不能倒置,一起必定不要抬箱門,避免門變形。

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