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逆轉(zhuǎn)錄PCR

時間:2013-7-29閱讀:1861
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 逆轉(zhuǎn)錄PCR,或者稱反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的一種廣泛應(yīng)用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成為互補(bǔ)DNA,再以此為模板通過PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增。由一條RNA單鏈轉(zhuǎn)錄為互補(bǔ)DNA(cDNA)稱作“逆轉(zhuǎn)錄”,由依賴RNA的DNA聚合酶(逆轉(zhuǎn)錄酶)來完成。隨后,DNA的另一條鏈通過脫氧核苷酸引物和依賴DNA的DNA聚合酶完成,隨每個循環(huán)倍增,即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解,留下互補(bǔ)DNA。
  RT-PCR的指數(shù)擴(kuò)增是一種很靈敏的技術(shù),可以檢測很低拷貝數(shù)的RNA。RT-PCR廣泛應(yīng)用于遺傳病的診斷,并且可以用于定量監(jiān)測某種RNA的含量。(檢測基因表達(dá)的方法,參見Northern Blot法。)
  RT-PCR有時候也會指代實(shí)時PCR(real-time PCR)。為了與逆轉(zhuǎn)錄PCR相區(qū)別,通常被寫作“定量PCR”(quantitative PCR)或者RTQ-PCR(real-time quantitative PCR)。

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