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上海一基實業有限公司
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MEM培養基的配制步驟

時間:2012-11-12閱讀:7018
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 MEM 1L 配方

1配置前準備:配置培養基新制備的milli water。調節pH值的酸堿溶液也應該使用這種水配置。制備培養基的器皿清洗干凈,并用milli water潤洗兩次。

2.溶解培養基:取5%終體積的milli water,加入到1L玻璃杯中,將干粉培養基倒入燒杯,水洗包裝袋內面兩次,倒入培養液中。磁力攪拌助溶。

3.補加試劑:根據包裝袋說明加入NaHCO3(2.2g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。

4.加抗生素:一般抗生素終濃度——青霉素100U/ml,鏈霉素100U/ml。1L加入10m儲備液。

5.調pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH調節pH到7.2.

6.過濾除菌:采用0.22um濾膜。過濾后分裝于小瓶中(100或200ml)。過濾后pH值一般上升0.1-0.3.

7.加小牛血清:根據培養基配置的量將小牛血清分裝,冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。

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