德國科學家獲得單個果蠅胚胎提取物細胞分裂的熒光圖像(Microimage譯)
德國科學家獲得單個果蠅胚胎提取物細胞分裂的熒光圖像(Microimage譯)
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德國EMBL的研究者利用共聚焦顯微鏡,*次在單個果蠅胚胎提取物中采集到一輪細胞分裂的圖像。
這一過程通常發(fā)生在果蠅胚胎的深層,對于動態(tài)顯微鏡來說是個挑戰(zhàn)。但是Ivo ley教授認為他們的體外方法將會揭開隱藏在細胞分裂后面的復雜機理。
以前對細胞分裂、有絲分裂的研究通常發(fā)生在從青蛙卵的細胞質提取物,但是很難在這個實驗里進行基因操作。
同時,利用幾千個在一系列發(fā)育階段的胚胎,對果蠅胚胎提取物做相似研究,很難對早期的有絲分裂拍照。
為克服以上問題,ley及其同事想要為單個胚胎提取物的有絲分裂成像。
為了獲得正在分裂細胞核的恰當樣本,研究者首先固定果蠅的胚胎在蓋玻片上,然后將其放到配有電動載物臺的倒置顯微鏡上。
他們將微量注射器放到支架上,再按到操作手上,并與油管腳踏板操作的雙向泵連接。
ley解釋說:操作器與微量控制器相連,方便在顯微鏡下,快速、程序化和重復化的微定位注射器。
“所有操作在極化明場照明條件下實施,的儀器控制是成功必需的。”他說。
為研究有絲分裂,他們首先用移液器刺穿細胞膜抽提胚胎。在將細胞物質注射到玻璃表面分析前,他們使用一個注射器泵從細胞中吸取。
zui重要的是,這些抽提物包含多種自主分裂細胞核,研究者可以進行體外成像,分別在60、90分鐘收集胚胎。
這種提取物中含有許多自主分裂細胞核,它將圖像,體外,在六十和九十分鐘采集胚胎。
研究者的新技術,捕獲少了細胞膜的細胞分裂。紅色:染色體,綠色:紡錘體。由Ivo ley/EMBL提供
“我們利用時序熒光顯微鏡和DNA標記或微管監(jiān)測有絲分裂,訣竅是要選對時機。每八到九分鐘,通過核分裂,胚胎循環(huán)一次。” ley解釋說。
研究者利用轉盤共聚焦進行共聚焦顯微鏡成像,ley補充說:對于研究這些完整的胚胎系統(tǒng),熒光顯微鏡是非常理想的,此時細胞核被錨定在胚胎皮層。
研究者認定在無細胞膜的系統(tǒng)里,研究細胞核會為細胞有絲分裂機制的微生物機制研究打開一扇門。
研究者現(xiàn)在希望使用關聯(lián)顯微鏡和電子顯微鏡研究果蠅抽提物。