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顯微鏡知識(shí)掃盲（6）----顯微鏡的基本分類及簡介
一 顯微鏡的分類很多，按一般的功能性可分為：
（1）生物顯微鏡：主要是用來看一些透明或半透明的液體和粉末狀的物體，主要用于微生物的檢查，還有醫(yī)院里的常規(guī)檢查。被觀察物體一般要切成片狀放與載玻片上。
（2）體視顯微鏡：因物鏡與觀察體距離較大，可進(jìn)行鏡下操作，可視范圍教大。常運(yùn)用于應(yīng)用于微電子行業(yè)，醫(yī)學(xué)外科等部門觀察體積相對(duì)大的物體。
（3）金相顯微鏡：主要是用來看金屬類，芯片類，不透明的物體等，放大倍數(shù)高
（4）偏光顯微鏡：主要是用是來觀察液晶、纖維等自身具有單折射性或雙折性的物體
（5）熒光顯微鏡，需要用特殊波段的光來照射的樣品，一般都是用熒光來看
（6）工具顯微鏡或測量顯微鏡：主要是用于工業(yè),帶測量尺可進(jìn)行測量的顯微鏡
（8） USB/AV顯微鏡：放大倍數(shù)20-400，帶有USB接口或圓形外接AV輸出數(shù)據(jù)接口，可以連接到電腦或電視等顯示器上，直接成像于連接的屏幕上。
二 其他顯微鏡的簡單介紹
1、 暗視場顯微鏡
暗視場顯微鏡又叫暗視野顯微鏡。它與普通的顯微鏡的主要區(qū)別是照明方式不同。它用強(qiáng)而窄的斜射光束照射標(biāo)本，而又不讓光束進(jìn)入物鏡。在沒有光進(jìn)入物鏡時(shí)，視場是黑暗的，故叫暗視場顯微鏡。但由于標(biāo)本中的微粒受光照射后能夠散射光線，當(dāng)散射光線進(jìn)入物鏡時(shí)，在顯微鏡中能夠看到微粒的散射光點(diǎn)，好象微粒本身在發(fā)光一樣。這道理正如在一間較暗的室內(nèi)，從墻上的小孔中射入一束強(qiáng)烈的陽光，我們?cè)诠饴飞夏軌蚩匆娀覊m的存在一樣。這種現(xiàn)象，在光學(xué)上被稱為丁道爾現(xiàn)象。暗視場顯微鏡就是根據(jù)這一原理設(shè)計(jì)的。
暗視場顯微鏡能夠觀察到0.004μm以上的微粒存在。普通顯微鏡看不見的微粒，它可以看見。但它只能看到物體的外表輪廓和運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，而不能辨認(rèn)其內(nèi)部結(jié)構(gòu)。
從結(jié)構(gòu)上看，只需將普通顯微鏡更換上一個(gè)暗視場聚光器即可變?yōu)榘狄晥鲲@微鏡。常用的暗視場顯微鏡有拋物面形和心形兩種。
它們的共同特點(diǎn)是在聚光鏡下面的*部分設(shè)有擋光板。照明光束只能從聚光鏡邊緣的環(huán)行圈內(nèi)進(jìn)入，經(jīng)透射鏡的反射面反射后，斜著射向標(biāo)本，并在蓋玻片上進(jìn)行全反射。其結(jié)果是既照亮了標(biāo)本。光束又不直接進(jìn)入物鏡，從而達(dá)到了暗視場照明的目的。
2、熒光顯微鏡
（一） 熒光顯微鏡的工作原理
一些物質(zhì)在受到人眼所看不到的高能紫外線激發(fā)照射時(shí)，會(huì)產(chǎn)生比原激發(fā)波長較長的可見光。人們把這種光叫做熒光。這種現(xiàn)象叫做熒光現(xiàn)象。有兩種熒光現(xiàn)象：一種是受激發(fā)光照射時(shí)，物質(zhì)本身能發(fā)熒光，叫做自體熒光。另一種是物質(zhì)要先經(jīng)過熒光色素染色，才會(huì)產(chǎn)生熒光現(xiàn)象。這后一種被稱為繼發(fā)熒光，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中大部分的測量都是繼發(fā)熒光。不同的熒光物質(zhì)所需要的激發(fā)光的波長不盡相同。而且受激后所產(chǎn)生的熒光光波也不相同。
通過觀察物質(zhì)所發(fā)出的熒光來對(duì)物質(zhì)進(jìn)行研究的顯微鏡叫做熒光顯微鏡。
采用熒光顯微鏡，可以觀察到普通顯微鏡看不見的無色透明的組織或細(xì)胞。一般是先將這些標(biāo)本用熒光色素染色，再將標(biāo)本放在熒光顯微鏡下，用紫外光線照射激發(fā)，使標(biāo)本發(fā)出熒光（可見光）然后通過顯微鏡，觀察標(biāo)本的熒光圖象。由此可見，熒光顯微鏡的光源不是作為照明用的，而是作為激發(fā)光，去激發(fā)熒光色素產(chǎn)生熒光。
（二） 熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)
和普通顯微鏡比較，首先熒光顯微鏡要有一個(gè)能產(chǎn)生高能紫外線的光源。一般采用汞燈或 氙燈作紫外光源，也有用 鎢燈的。紫外光源因其功率較大（100W以上）尤其是汞燈和氙燈所需要的電壓高達(dá)上千伏，一般都專門設(shè)一個(gè)電源箱來供電。
其次是從光源燈到標(biāo)本之間，紫外線所經(jīng)過的所有光學(xué)元件，均需使用對(duì)紫外線通透性能好的材料如石英制成。普通的光學(xué)玻璃不能透過320nm以下的紫外線。如果 所用的激發(fā)光線較長，如350nm以上，則普通光學(xué)玻璃也能使用。
zui后，在光源與標(biāo)本之間需要設(shè)置激發(fā)率光片，用以選出照射標(biāo)本所用的激發(fā)光，在標(biāo)本和目鏡之間設(shè)有熒光（或曰發(fā)射）濾光片，該濾光片只讓熒光通過，而隔斷紫外線（紫外線對(duì)眼睛有傷害）。激發(fā)和熒光濾光片可以各有多塊，以便滿足不同的需要。
（三） 透射式熒光顯微鏡
根據(jù)光線對(duì)標(biāo)本照射方式不同，熒光顯微鏡可分為透射式和落射式兩種。光路中除了增加了激發(fā)光熒光兩塊濾光片外，其余部分和普通電光源顯微鏡基本相同。只是該機(jī)為了避免直射入市場，使用了暗視場聚光器。當(dāng)然，也可以不使用暗視場聚光器。這種方式適合于觀察無色透明的標(biāo)本，應(yīng)用較廣。但現(xiàn)在已不使用了。
（四） 落射式熒光顯微鏡
從光源發(fā)出激發(fā)光，經(jīng)聚光鏡會(huì)聚，再經(jīng)聚光鏡和激發(fā)濾光片后射向分鏡。分鏡具有這樣的特性，它能反射波長較短的紫外線而讓波長較長的熒光通過。激發(fā)光經(jīng)它反射后射向物鏡，再經(jīng)物鏡聚光，垂直射向標(biāo)本。標(biāo)本受到激發(fā)后產(chǎn)生出熒光。熒光經(jīng)過物鏡和分鏡后，到達(dá)熒光濾光片。熒光濾光片將標(biāo)本產(chǎn)生的熒光之外的光濾除掉，而只讓熒光通過目鏡送入人眼中。這種裝置，光源處在標(biāo)本的上方，故稱為落射式。它適用于觀察透明度不好的標(biāo)本以及各種活體組織。
3、倒置顯微鏡
倒置顯微鏡的光路 光源燈產(chǎn)生的光經(jīng)聚光鏡照射在標(biāo)本上。標(biāo)本經(jīng)物鏡放大、以及轉(zhuǎn)換系統(tǒng)轉(zhuǎn)換后成像在目鏡的物方焦平面上，經(jīng)目鏡再一次放大后，由人眼觀察。
照明系統(tǒng)位于標(biāo)本之上，而物鏡則在標(biāo)本之下，這和一般的生物顯微鏡正好相反，"倒置"的名字由此而得。
倒置顯微鏡只是顯微鏡的形態(tài)與正置有區(qū)別而已，但都可以配置相差、熒光、DIC、HMC、偏光等裝置。