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在同一條件下做WB實驗為什么一張膜顯影，一張膜未顯影？
閱讀：5928 發布時間：2014-9-1近期恒遠經常接到客戶的：同一條件下，除了測的指標不一樣，為什么有張膜顯影，有張未顯影？？？
上海恒遠技術分析：在同一條件下，如果一張膜顯影，一張膜未顯影，可以逐一查找原因：
1、你是否兩張膜上都設有陽性對照？如果有，一張膜有信號，一張沒信號，可能是操作過程中有問題（可能原因是（1）、你結合底物會不會有問題，即沒有充分結合好，或者結合時間太短，（2）、你要確定兩張膜都是用新的底物反應液，（3）、就是沒有信號的膜會不會壓片時間太短，如果使用儀器掃片就不存在這種問題，）所以原因比較多，你只能逐一排查。
2、如果沒有設對照，這個問題就更復雜，而且解決起來也不科學。同時，要控制兩個膜條件*一樣是很困難的。即使你是同時做的兩個，那一定有一個先上樣，一個后上樣，而且你跑膠的時候會發現，兩塊膠上的條帶速度肯定是不一樣的，轉膜兩個膜放的位置也肯定不一樣，等等，也許這些小問題都不能導致你壓片不出條帶，我只是想說，兩個條件不可能*相同，western blot實驗就是重復性比較差，所以一個出一個不出，這樣是正常的。