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動物檢驗檢疫中定量的核酸檢測技術

閱讀:1266          發布時間:2014-3-11

在動物檢驗檢疫中核酸檢測技術大多數無需要求定量,所以在這只作簡單介紹。核酸檢測的定量化在人醫臨床和動物疫病基礎研究中應用較多,可用于病情評估、療效預測和觀察及預后判斷、疫病的病理分析,具有一定的應用價值。核酸的定量檢測一般有以下兩種方法。

    (1)定量的核酸雜交技術  此類技術以分支鏈DNA信號放大技術(branched DNA signal amplification assay,bDNA)為典型代表,bDNA技術系美國Chiron公司的,屬于一種改良的核酸雜交技術,它定量的基本原理是樣品中被檢的特異性核酸越多,結合的探針也就越多,導致信號越強。此技術zui關鍵的部分是信號很強的探針,因此和其他核酸雜交技術相比,bDNA技術的靈敏度很高。國內已有一些醫院采用bDNA技術進行HBV基因和HCV基因的定量檢測。

    (2)定量的PCR技術  此類技術有終點稀釋法、熒光PCR、競爭PCR、PCR-ELISA等模式。現在zui常用的是前面所述的熒光PCR技術。它定量的基本原理是樣品中被檢的特異性核酸越多,熒光信號突破臨界值所需的擴增循環數(即Ct值)越小。

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