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技術(shù)文章

單克隆抗體技術(shù)原理

閱讀:1638          發(fā)布時(shí)間:2019-4-16

導(dǎo)讀:?jiǎn)慰寺】贵w是指一個(gè)B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞所形成的,產(chǎn)生只針對(duì)一個(gè)抗原決定簇的純抗體。
   B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下,能夠分化、增殖形成具有針對(duì)這種抗原分泌特異性抗體的能力。B細(xì)胞的這種能力和量是有限的,不可能持續(xù)分化增殖下去,因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的。將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)一步克隆化,這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤的無(wú)限生長(zhǎng)的能力,又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力,將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的價(jià)、單一的特異性抗體。這種技術(shù)即稱(chēng)為單克隆抗體技術(shù)。

制備單克隆抗體的方法是用缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤細(xì)胞變異株與脾臟的B細(xì)胞融合。采用HAT選擇性培養(yǎng)基(培養(yǎng)基中加次黃嘌呤HyPoxanthineH,氨基喋呤AminoopterinA及胸腺嘧啶核苷ThymidineT),在這種選擇性培養(yǎng)基中,由于變異的瘤細(xì)胞不具有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶或胸腺嘧啶核苷激酶,所以不能利用培養(yǎng)基中的次黃嘌呤或胸腺嘧啶核苷而合成DNA。而只能利用谷酰胺與尿核苷酸單磷酸合成DNA,這一途徑又被氨基喋呤所阻斷,所以未融合的瘤細(xì)胞不可避免也要死亡。融合的雜交瘤細(xì)胞由于脾淋巴細(xì)胞具有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶,可以通過(guò)次黃嘌呤合成DNA,克服氨基喋呤的阻斷,因此雜交瘤細(xì)胞大量繁殖而被篩選出來(lái)。B淋巴細(xì)胞在一般培養(yǎng)基中不能長(zhǎng)期生長(zhǎng),一般于二周內(nèi)均死亡。

單克隆抗體與常規(guī)抗體相比有如下優(yōu)點(diǎn):①單一特異性,與一個(gè)抗原決定簇反應(yīng);②可重復(fù)性,能夠提供*一樣的抗體制劑;③一經(jīng)制出,可無(wú)*地供應(yīng);④生產(chǎn)單克隆抗體,不一定需要純的抗原;⑤能查出混合物中存在的用常規(guī)方法查不出的少量成分。

    上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司采用進(jìn)口材料生產(chǎn),專(zhuān)業(yè)的酶免專(zhuān)家,提供免費(fèi)代測(cè),數(shù)據(jù)分析,技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)全國(guó)各地。多年以來(lái)我們以極其苛刻的要求控制產(chǎn)品的質(zhì)量,堅(jiān)持生物科學(xué)研究與世界同步的理念。因此也得到了全國(guó)各大醫(yī)院院校、*醫(yī)院、研究所,科研機(jī)構(gòu)等單位的一致認(rèn)可,并發(fā)表了多篇文獻(xiàn)。歡迎訂購(gòu)!

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