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NEXT GEL 5%//NEXT GEL 5% ACRYLAMIDE SOLN PROTEIN/M254-100ML（2） 洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml 藥品生產(chǎn)企業(yè)首先應(yīng)把握好標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）的來源，要使用國家認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)品（對照品），并按要求對其進(jìn)行正確性驗(yàn)證；第二對工作對標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）、開封過的標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）、標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）貯備液的貯存條件和使用期限進(jìn)行驗(yàn)證，并作出明確的文件規(guī)定，同時(shí)作好各項(xiàng)記錄；第三應(yīng)按要求做好標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）賬目管理、領(lǐng)用登記，并在規(guī)定條件下貯存。elisa實(shí)驗(yàn)步驟：1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測。抗體的親和力 是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。elisa底物：底物請避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。 建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數(shù)。依照有關(guān)規(guī)定，中國用于藥品成品檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）來源有：一是中國藥品生物制品檢定所提供的標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）；二是其他國家的標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）；三是省級以上藥品檢驗(yàn)所標(biāo)定，并經(jīng)同級食品藥品監(jiān)管局批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)品（對照品）。

NEXT GEL 5%

NEXT GEL 5% ACRYLAMIDE SOLN PROTEIN
M254-100ML
蛋白組學(xué)級

100ML
RT
No
NEUROTOXIN / SUSPECTED CARCINOGEN / HIGHLY TOXIC / IRRITANT/SUSPECTED TERATOGEN

41105319
1 year
Acrylamides
NEXT GEL Products
PROTEOMICS GRADE


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而對于多抗來講，一旦確定了免疫原并免疫了動(dòng)物，其產(chǎn)生的抗體的特異性等是不可控的，因而無法保證一定能獲得成功應(yīng)用的抗體。elisa細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。抗體的效價(jià)鑒定 不管是用于診斷還是用于治療，制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。elisa酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法"（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。不*抗原,即半抗原（hapten）是只具有免疫反應(yīng)性，而無免疫原性的物質(zhì)，故又稱不*抗原。
關(guān)鍵詞：254-100ML