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Protein A/G-Plus Beads
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更新時(shí)間:2025/1/3 21:00:07

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供應(yīng)簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品使用Protein A與Protein G的抗體結(jié)合結(jié)構(gòu)域融合后的重組蛋白和4%濃度的瓊脂糖樹脂偶聯(lián)制成。


詳細(xì)介紹

 Protein A/G-Plus Beads抗體純化柱使用說(shuō)明

【產(chǎn)品說(shuō)明】 
   本產(chǎn)品使用Protein A與Protein G的抗體結(jié)合結(jié)構(gòu)域融合后的重組蛋白和4%濃度的瓊脂糖樹脂偶聯(lián)制成。由于采用了重組表達(dá)的Protein A/G,并去除了其白蛋白結(jié)合區(qū),該基質(zhì)能夠特異性地結(jié)合多種免疫球蛋白的Fc區(qū)段,作為親和樹脂,可用來(lái)純化不同來(lái)源的抗體和抗體亞型,以及在免疫共沉實(shí)驗(yàn)中捕獲免疫復(fù)合物。本產(chǎn)品使用了多位點(diǎn)交聯(lián)技術(shù),穩(wěn)定性好、特異性高并具有廣譜結(jié)合力,每ml基質(zhì)可特異性結(jié)合6-10 毫克抗體。 
【產(chǎn)品組分】 
    50% Protein A/G Agarose懸液,PBS,20%乙醇 
【儲(chǔ)存條件】 
    4℃保存,有效期一年;常溫(15~25℃)運(yùn)輸;切勿凍結(jié)!
【抗體純化】 
    1) 取適量Protein A/G Agarose懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。 
    2) 含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后,緩慢加入層析柱。 
    3) 用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無(wú)蛋白檢出。 
    4) 加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7),夾住流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測(cè)定OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測(cè)純度。也可以選擇0.1 M甘氨酸(Glycine, pH 3.0)洗脫。
    5) 洗脫后的抗體加入2/5體積的1 M Tris,pH 8.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,通常為2×PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
    6) 濃縮到所需體積,加入50%甘油;測(cè)定效價(jià)后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
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