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Fluoro AChE檢測試劑盒

2017-5-16  閱讀(1171)

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貨號品名規格2017年價格
AChE 100-2Fluoro AChE - 100 tests100 Tests7225

產品描述:

保存溫度:2-8度

主要優點:

  • 無需放射性物質。
  • 應用 - 流式細胞儀或熒光顯微鏡。
  • 檢測細胞水平的細胞溶解活性。
  • 適用于多種類型的哺乳動物細胞系。

技術

測量CMC / ADCCzui常用的方法是放射性鉻-51(51Cr)釋放試驗(2)。該測定有幾個缺點:昂貴的,難以加載某些細胞類型,由于嚴格的環境規定而處置昂貴,并且具有51Cr自發釋放的高背景。使用流式細胞儀,現在可以消除對放射性物質的需要,并增加在單個細胞基底上定量細胞溶解活性的能力。各組已經證明通過流式細胞術測量CMC / ADCC活性與傳統的51Cr釋放測定(3,4,5,6)具有強烈(95%)的相關性。

測定原理

細胞跟蹤染料CFSE(7,8,9)用于標記靶細胞群體。在測定完成實驗方案后,加入7AAD(活/死)(10,11)以測量細胞死亡。7AAD僅進入膜受損細胞并與DNA結合。

流式細胞術用于門靶細胞并測量7AAD陰性對7AAD后細胞。%細胞毒性通過以下等式計算(參見下面的實驗例):

7AAD正(右上象限)= R1 / 7AAD Postitve(右上象限)= R1 + 7AAD負(右下象限)= R2 ×100 
ACT1

為了測試豬gd淋巴細胞的自然殺傷能力,將K562細胞染色并調整至含有10%FBS的1×10 4個細胞/100μlPRMI的終濃度。以25:1,50:1和100:1的E / T比加入gd淋巴細胞,調節至400μlRPMI的總體積,然后在37℃,無菌封蓋的面管中孵育4小時。孵育后,將活/死染色劑直接加入每個管中,在冰上孵育15分鐘并通過流式細胞術分析。

引用文獻

  • a. Perussia, B., (1998). Current Topics in Microbiology and Immunology 230, p63.
    b. Whiteside, T.L., Rinaldo, C.R. and Herberman, R.B. (1992) Cytolytic Cellfunctions. In: N.R. Rose, E.C. de Macario (Eds.), Manual of Clinical Laboratory Immunology. American Society for Microbiology. Washington, DC, p. 220.
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  • Olin, MR. Thesis, K. Cho, J. and Molitor, T.W. Morphine Suppresses Microglial Directed Cytolytic Activity by gd Lymphocytes. Journal of Neuroimmunology; Publication in process.
  •  

 

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