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ALZET迷你滲透膠囊 MODEL2002 使用Protocol 

概述：

ALZET

滲透泵是一種小型、可植入式的膠囊，可應(yīng)用于小鼠、大鼠及其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研

究。該膠囊無(wú)需進(jìn)行外部連接或頻繁處理，就能以恒定的速率持續(xù)給藥一天到四周的時(shí)間。

LOT NO.    10212-08 

平均泵出速率  0.51      ul/HR 

標(biāo)準(zhǔn)差       0.02       ul/HR 

平均灌注體積 244.6       ul 

標(biāo)準(zhǔn)差       6.0         ul 

一、ALZET迷你滲透膠囊MODEL2002基本描述

A.性能（37℃）

泵送率  0.5 μl/hr (± 0.1 μl/hr)

持續(xù)時(shí)間 14天

膠囊容量 200ul 

B.組件

1.灌注管（filling tube）

2.流量調(diào)節(jié)器（flow moderator）

3.膠囊（pump body materials）

二、ALZET迷你滲透膠囊MODEL2002使用注意點(diǎn)

1. ALZET迷你滲透膠囊不可重復(fù)使用

2.膠囊必須被溶液充滿，同時(shí)需要記錄灌注量

3.溶解藥物的溶劑需與膠囊材料相兼容

4.在實(shí)驗(yàn)過程中，藥物在溶劑中要保持穩(wěn)定

5.藥物的質(zhì)量輸出速率用方程式ko = Q • Cd計(jì)算，ko為藥物質(zhì)量輸出速率g/hr)，Q是膠囊中溶液的體積輸出速率(l/hr)，Cd為藥物濃度(g/l)

6.在對(duì)膠囊進(jìn)行灌注，操作以及手術(shù)植入過程中要確保無(wú)菌

7.如果要想膠囊立刻起作用，或者膠囊中灌注的是粘性溶液，或者如果附加一根導(dǎo)管，那么膠囊需在無(wú)菌的37℃生理鹽水中至少孵育4-6小時(shí)（是隔夜）

8.如果膠囊使用的環(huán)境與正常的哺乳動(dòng)物的體溫以及滲透壓顯著不同時(shí)，膠囊的泵送率可能會(huì)受到影響。

9. 膠囊在給藥完成后或植入21天內(nèi)需取出，如超時(shí)，膠囊附近組織內(nèi)的水分會(huì)進(jìn)入膠囊，導(dǎo)致局部組織隆起，并處于高鹽狀態(tài)，對(duì)機(jī)體組織產(chǎn)生傷害。

10.通過與導(dǎo)管連接，ALZET迷你滲透膠囊可向動(dòng)靜脈循環(huán)，大腦，器官，內(nèi)腔等持續(xù)提供藥物。

11.在實(shí)驗(yàn)過程中通過監(jiān)測(cè)血藥濃度可以驗(yàn)證膠囊實(shí)驗(yàn)的正確性，同時(shí)通過查看試驗(yàn)完成后膠囊中藥物的剩余量，以及進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)等也可驗(yàn)證。

三、ALZET迷你滲透膠囊灌注方法步驟

藥物充滿膠囊很重要，正確的灌注方法下面已經(jīng)給出。膠囊中有氣泡或者不能正確將流量調(diào)節(jié)器插入膠囊將會(huì)導(dǎo)致不可預(yù)測(cè)的藥物泵送率波動(dòng)。

在灌注和植入過程中應(yīng)戴手套；另外大量的油脂如果在皮膚表面聚積，可能會(huì)影響膠囊性能；如果膠囊被污染了，應(yīng)用70%的異丙醇擦拭，切忌不能用異丙醇浸泡；注意要在常溫下灌注藥物。

STEP1：稱量空膠囊以及它的流量調(diào)節(jié)器（總重）

STEP2：利用27式灌裝管以及1ml的注射器灌裝膠囊。若使用較大注射器，由于灌裝速度過快，可能會(huì)在膠囊中產(chǎn)生氣泡。用注射器抽取藥物溶液，裝上灌裝管。需要注意的是注射器和與其連接的灌裝管之間不能有氣泡。

STEP3：拔掉流量調(diào)節(jié)器，將膠囊直立，從膠囊頂部的小開口插入灌流管，直到不能再插入為止。此時(shí)灌流管的接近膠囊的底部。

STEP4：保持膠囊直立，緩慢推注射器的活塞。當(dāng)藥物溶液到達(dá)膠囊頂部小開口處停止灌注，小心移去灌注管（速度快了可能會(huì)產(chǎn)生氣泡）。

STEP5：擦掉溢出的藥物溶液，插入流量調(diào)節(jié)器直到白色帽子到達(dá)膠囊頂部為止。插入的流量調(diào)節(jié)器將會(huì)取代部分已經(jīng)灌注到膠囊中的藥物溶液，溢出的溶液需要擦干凈。確保該裝置正常運(yùn)行，需要將流量調(diào)節(jié)器全部插進(jìn)膠囊中。

STEP6：稱量灌滿后的膠囊（連同流量調(diào)節(jié)器），步驟6和步驟1的差值為灌注的藥物溶液的凈重。對(duì)于大多數(shù)稀釋的水溶液，重量（mg）=體積（ul）。灌注的體積應(yīng)該大于平均灌注體積（Mean Fill 

Volume）的90%，即244.6*0.9=220.41。如果是這樣的話，灌裝后的膠囊就可以使用了，如果不滿足以上條件，說(shuō)明膠囊中含有氣泡，不能使用。

如果在灌注過程中阻力較大，可在灌注過程中將灌注管小角度翹起，灌注的小孔可通過來(lái)回移動(dòng)灌注管而擴(kuò)大，或者在插入灌注管之前多次插入及拔出流量調(diào)節(jié)器以達(dá)到擴(kuò)大灌注孔的目的。

四、藥物溶液如何配制及與膠囊的兼容性膠囊與水，稀釋的酸，堿溶液以及與稀釋的或低濃度的

DMSO，酒精兼容，也與丙烯和聚乙二醇兼容。ALZET膠囊與脂肪族，芳香烴類化合物不兼容，例如庚烷，甲苯，動(dòng)植物油脂。使用不兼容的溶劑可能導(dǎo)致膠囊喪失功能。下表提供了一些與膠囊兼容的常用的已知溶劑。

注意，以上溶劑只是與膠囊材料相兼容，實(shí)際操作過程中，還要注意是否與組織或體液兼容。

溶液在膠囊中產(chǎn)生氣泡可能會(huì)影響藥物的泵送率，溶液中如果含有一些沉淀的不溶顆粒時(shí)需要過濾后使用，ALZET泵能夠泵出均質(zhì)的粘性溶液（粘度小于100000厘泊），懸浮液如果不沉淀也能被泵出。為了確保泵出速率的一致性，在持續(xù)泵出過程中懸浮液需保持均質(zhì)。

五、ALZET滲透膠囊體內(nèi)植入手術(shù)

ALZET滲透膠囊可被植入動(dòng)物皮下，動(dòng)物重至少20g。首先在肩胛骨間的皮膚處切一小口，然后用止血鉗將皮膚和皮下結(jié)締組織分開，形成一個(gè)小的袋。將膠囊插入，流量調(diào)節(jié)器朝里，皮膚開口可縫合或者用夾子夾住。

LZET滲透膠囊可被植入動(dòng)物腹部，動(dòng)物重至少150g。首先在動(dòng)物胸腔下面皮膚開一個(gè)中線小口，然后在皮膚下的腹部肌肉處開一個(gè)小口，將膠囊流量調(diào)節(jié)器朝內(nèi)插入腹部。肌肉開口用線縫合，皮膚開口可用線縫合也可用夾子夾住。

六、ALZET滲透膠囊的檢測(cè)

ALZET是精密的給藥工具，泵送率和灌注體積已經(jīng)給出，膠囊在4-6小時(shí)的啟動(dòng)時(shí)間后，給藥速率趨于恒定，直到剩余5%的藥物時(shí)，泵送率迅速下降，直到0為止。

DURECT方法是在37℃（+-0.5℃）下，0.9%的生理鹽水中離體測(cè)量泵送率，這種方法具有較好的可重復(fù)性。

A.離體質(zhì)量檢測(cè)

選取20個(gè)相同型號(hào)膠囊作為隨機(jī)樣本，膠囊中充滿染液。充滿后，膠囊浸沒在0.9%的生理鹽水（37℃）中，每隔一定時(shí)間將膠囊轉(zhuǎn)移到含有新鮮生理鹽水的試管中，直到第14天，對(duì)膠囊中泵出染料進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)分析。在4-336h過程中，每個(gè)膠囊都以恒定速率泵出染料。通過DURECT實(shí)驗(yàn)，每個(gè)膠囊的時(shí)間依賴泵送率變量系數(shù)小于10%，均值的標(biāo)準(zhǔn)誤為5%。

B.啟動(dòng)時(shí)間

如果膠囊在室溫下灌注，浸沒到等滲的生理鹽水（37℃），泵送率在幾小時(shí)內(nèi)不會(huì)達(dá)到穩(wěn)定。如果實(shí)驗(yàn)要求立即給藥，DURECT建議將未灌注藥物的膠囊浸沒在0.9%的生理鹽水中4-6小時(shí)（隔夜37℃），如果與導(dǎo)管相連或者灌注粘性藥物時(shí)，以上步驟必須進(jìn)行。

C.藥物持續(xù)泵送的驗(yàn)證

藥物持續(xù)泵送可通過方程D = (V/Q) (.95)驗(yàn)證，D是持續(xù)時(shí)間，V是規(guī)格書中給出的膠囊泵送容量體積（ul），Q是泵送率（ul/hr）。

七、驗(yàn)證ALZET滲透膠囊的準(zhǔn)確性

為了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否來(lái)自持續(xù)給藥，DURECT建議ALZET膠囊使用者在實(shí)驗(yàn)過程中的幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)血液藥物水平。注意不能將zui后膠囊中剩余空間作為泵出的藥物量，因?yàn)?/span>在實(shí)驗(yàn)過程中，膠囊會(huì)吸收水分，同樣，切開一個(gè)用完的膠囊來(lái)驗(yàn)證其性能也是不可靠的。

A.確定平均泵送率

ALZET迷你滲透膠囊的容量體積稍微大于14天泵出的溶液量。zui后，會(huì)有一些藥物溶液殘留在膠囊內(nèi)，可用灌注管和1ml的注射器吸走。用額外的溶劑沖洗膠囊，對(duì)剩余藥物溶液進(jìn)行分析，算出殘余藥物量。平均泵送率=（起始藥物量-殘余藥物量）/運(yùn)行時(shí)間。

B.確定離體實(shí)驗(yàn)泵送率

ALZET迷你滲透膠囊給出的體積泵送率是在等滲的生理鹽水（37℃）中測(cè)定的，用戶發(fā)現(xiàn)檢測(cè)泵送率是必需的。DURECT給出了以下步驟：

Step1：準(zhǔn)備一種能溶于生理鹽水的已知濃度溶液作為指示劑。泵出的指示劑的量作為計(jì)算泵送率的基礎(chǔ)。指示劑必需與膠囊相兼容，同時(shí)還容易在等滲的生理鹽水中進(jìn)行分析。

Step2：根據(jù)第三部分的方法將指示劑溶液灌注到膠囊中。

Step3：將膠囊放進(jìn)一只裝有15ml等滲生理鹽水的20ml試管中，在37℃中進(jìn)行預(yù)孵育，用塞子塞住試管，以防蒸發(fā)。