注意事項
1、電泳中使用的溴化乙錠（EB）為中度毒性、強致癌性物質，務必小心，勿沾染于衣物、
皮膚、眼睛、口鼻等。所有操作均只能在專門電泳區域操作，戴一次性手套，并及時更換。
2、預先加入EB 時可能使 DNA 的運動速度下降15%左右，且不同構型的 DNA 的影響程度不同。所以為取得較真實的電泳結果可以在電泳結束后再用 0.5μg/ml 的 EB 溶液浸泡染色。EB在光照下易降解，若凝膠放置一段時間后才觀察，即使原來膠內或樣品已加 EB，建議選擇EB溶液浸泡染色。
3、加樣進膠時不要形成氣泡，需在凝膠液未凝固之前及時**，否則，需重新制膠。
4、電泳時溴酚蘭在瓊脂糖凝膠中的運動速度可以用于參考電泳速度，已實際電泳條帶運動速度為準。
常見問題分析

常見問題	原因	對策
DNA條帶模糊	DNA降解	實驗過程避免核酸酶污染
	電泳緩沖液陳舊	電泳緩沖液多次使用后，離子強度降低，PH值上升，緩沖能力減弱，從而影響電泳效果。TBE建議使用10次就更換緩沖液
	所用電泳條件不合適	電泳時電壓不應超過6V/CM，溫度＜30℃，巨大DNA鏈電泳，溫度應＜15℃，核查所用電泳緩沖液的緩沖能力，注意經常更換
	DNA上樣量過多	減少凝膠中DNA上樣量
	DNA含鹽過高	電泳前通過乙醇沉淀去除多余鹽分
	有蛋白污染	電泳前酚抽提去除蛋白
	DNA變性	電泳前勿加熱，用TE緩沖液稀釋DNA
出現片狀拖帶或涂抹帶	PCR擴增有時出現涂抹帶或片狀帶或地毯樣帶。其原因往往PCR體系需要優化，PCR程序需要摸索。	其對策有：調整PCR體系和PCR程序，摸索出合適的條件。
不規則DNA帶遷移	電泳條件不合適	電泳時電壓不應超過6V/CM，溫度＜30℃，巨大DNA鏈電泳，溫度應＜15℃，核查所用電泳緩沖液的緩沖能力，注意經常更換
不規則DNA帶遷移	DNA變性	電泳前勿加熱，用TE緩沖液稀釋DNA
帶弱或無DNA帶	DNA上樣量不夠	增加DNA上樣量，聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度高，上樣量可適當降低
	DNA降解	實驗過程避免核酸酶污染
	DNA跑出凝膠	縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度
	EB染色的DNA，所用光源不合適	應用短波長（254nm）的紫外光源
DNA帶缺失	DNA跑出凝膠	縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度
	分子大小相近的DNA帶不易分辨	增加電泳時間，核準正確凝膠濃度
	DNA變性	電泳前勿加熱，用20mM Nacl 緩沖液稀釋DNA
	DNA鏈巨大，常規凝膠電泳不合適	在脈沖凝膠電泳上分析
電泳時Ladder扭曲	配膠的緩沖液和電泳緩沖液不是同時配置	同時配置，電泳緩沖液高出液面1-2mm即可
電泳時Ladder扭曲	電泳時電壓過高	電泳時電壓不應超過6V/CM

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電泳儀常見問題處理方法

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