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2024年4月，《Heliyon》上發(fā)表論文：

“Quantitative proteomics assay reveals G protein-coupled receptor kinase 4-induced HepG2 cell growth inhibition"

“定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析顯示G蛋白偶聯(lián)受體激酶4誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)抑制"

摘要：

背景與目的

探討G蛋白偶聯(lián)受體激酶4 (GRK4)對(duì)HepG2細(xì)胞的生物學(xué)作用及其可能的生物學(xué)機(jī)制。

材料與方法

用過表達(dá)grk4的慢病毒載體(OE)和陰性對(duì)照慢病毒載體(NC)感染HepG2細(xì)胞，用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)評(píng)估細(xì)胞增殖、周期和凋亡。利用定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析比較OE細(xì)胞和NC細(xì)胞的蛋白譜和差異表達(dá)蛋白(DEPs)，并利用生物信息學(xué)分析和平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)(PRM)技術(shù)研究其功能、表達(dá)和可能的機(jī)制。

結(jié)果

接受OE的HepG2細(xì)胞比接受NC的HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)更慢。流式細(xì)胞儀顯示，與NC細(xì)胞相比，OE細(xì)胞發(fā)生了s期周期阻滯，OE細(xì)胞和NC細(xì)胞均未發(fā)生凋亡。在定量蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定的7006個(gè)蛋白中，根據(jù)過濾參數(shù)檢測(cè)了403個(gè)DEPs，其中135個(gè)表達(dá)下調(diào)，268個(gè)表達(dá)上調(diào)。除了參與過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)信號(hào)通路外，DEPs還參與細(xì)胞增殖、周期和代謝的生物學(xué)過程。PRM驗(yàn)證了與PPAR通路相關(guān)的DEPs的表達(dá)。

結(jié)論

本研究表明，GRK4可阻止HepG2細(xì)胞增殖，使細(xì)胞周期阻滯在s期，而PPAR通路通過GRK4參與HepG2細(xì)胞的調(diào)控。

在該研究中，對(duì)HEK293T和HepG2細(xì)胞、慢病毒處理的細(xì)胞的體外培養(yǎng)，用到了Ausbian進(jìn)口胎牛血清。